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1 wb的基本原理是什么？用于检测什么指标？如何将其提取，如果我需要的蛋白质在细胞核内，如何处理？
首先在SDS－PAGE胶中将蛋白以大小区分，再转到固相支持物－膜（硝纤、PVDF、尼龙膜）上，利用抗原抗体结合的特异性结合目的蛋白的一抗，之后结合酶标二抗，利用酶底物反应原理使结果可见。至此，即可高灵敏性的检测特异性蛋白质的表达及差异表达。
核蛋白较胞浆蛋白有量少、可能与DNA结合、需要破核的特点，因此提取时应尽可能破核完全，总蛋白浓度高一点。
2.我从动物脑组织中提取样品有什么要求？是否一定查找文献到明确所取的组织中含有这个蛋白才可以？ 取样的大小如何要求？取材后如何保存？包括用的试剂和保存设备和条件？
取组织时要尽可能快，组织新鲜，因为细胞死亡破裂后有很多酶释放会降解蛋白。
最好确定所取组织中有这个蛋白表达，要么就是你怀疑该组织有表达需要实验证明。
裂解液是根据组织大小加的，所以取样大小没有一定的要求，一般新手可多取点备用。
如果取材后不直接提蛋白，应迅速低温保存，－80度或液氮，不需试剂，可在需要时再提蛋白。
3.我需要从试剂公司购买什么物品？是否单纯的抗体就可以？还是有什么特殊的要求？
要买的东西甚多，我曾帮别人列过几次清单，但要看具体你已经有什么东西了。大体可分为几块：蛋白提取，SDS－PAGE电泳，电转，检测系统的试剂；离心机、电泳电转设备、电泳仪、摇床等仪器。
