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标题:【求助】western-blot

rxcc33[使用道具]
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发表于 2014-6-27 18:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】western-blot

我要做western-blot，正在准备东西，想问师哥师姐们PVDF膜 、辣根过氧化物酶标记的二抗、 内参照、 ECL发光试剂、 X光片这些东西买哪些公司的比较好，我的经费不多，买一抗已经花了好多，所以希望能够买到物美价廉的东西，请做过western的师哥师姐们给我一些建议，不胜感激啊！
另外，封闭液用脱脂奶粉或牛血清白蛋白那个更好一些，是不是一抗二抗都用封闭液稀释，请多多指点。
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douding66[使用道具]
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发表于 2014-6-27 18:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相对“一抗”而言其余的都是比较便宜的了，买了"一抗"就可以了，可以同其他人交换使用，互通有无。二抗和酶底物用KPL的不错，我们一直在用，底物用cell signal也可以。
封闭夜用脱脂奶粉或牛血清白蛋白都可以，牛血清白蛋白比脱脂奶粉贵！
一抗二抗都用封闭液稀释，二抗也可以用TBS稀释，效果也可以。
PVDF用milipore
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2014-6-27 18:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我一抗买了santa的，买后有人说santa的抗体性价比不好，听了很郁闷，毕竟是好贵的东东~~我马上要做western了，希望一切顺利，也希望大侠以后多多指点啊！
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发表于 2014-6-27 18:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

一 抗二抗都可以用TBST稀释.这个可以使用BSA,一抗用SIGMA二抗随便都可以出很好的结果,只是价钱比较贵,但推荐!其他的价钱都不贵,关键是一抗.!奶粉建议用国外的.
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发表于 2014-6-27 18:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我一抗买了santa的，买后有人说santa的抗体性价比不好，听了很郁闷，毕竟是好贵的东东~~我马上要做western了，希望一切顺利，也希望大侠以后多多指点啊！

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没有什么可郁闷的，santa的抗体挺好的，毕竟大公司做的，我们也有santa的抗体，一直都可以的。只要不是买国产的就行（不是我崇洋媚外，国内有的公司是分装国外的抗体，稀释后拿出来卖，虽然便宜，效价就差了）。
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2014-6-27 18:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
知道了~~非常感谢~~明天就要买这些东西了~~我会听取你们的建议的~~(看来不买国内分装是对的~~呵呵~~）
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发表于 2014-6-27 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
上海xx生物公司提供PVDF膜 、HRP标记的二抗、 HRP标记的内参
（GADPH、beta-actin、beta-tubulin）、 ECL发光试剂盒（高敏及超敏）、
X光片。
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bamboo16[使用道具]
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发表于 2014-6-27 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
奶粉都要用国外的？太那个了吧？
我用的国产几种奶粉都好好的，甚至都过期1年多了都没任何问题！
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