【求助】请教一个SDS－PAGE灌胶问题

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标题:【求助】请教一个SDS－PAGE灌胶问题

deducte[使用道具]
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发表于 2014-6-28 12:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

刚开始做SDS－PAGE,经验不足，请各位大侠出手
我做的是不连续胶，垂直电泳，我遇到一个问题
我的分离胶和浓缩胶之间总是有一些小气泡。
请问有什么办法解决？

wood533[使用道具]
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发表于 2014-6-28 13:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有气泡会影响你跑胶时的电流,从而会影响你的蛋白条带的效果!及泳动速度!
所以一定要把气泡弄掉!
拿一个注射器,用针尖将气泡吸掉!

xyw5[使用道具]
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发表于 2014-6-28 13:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你有没有用水压胶啊，压过胶的话气泡一般不容易存在啊！
还有，你是不是在液体温度很低的情况下制胶的，要稍等液体升温后配胶，低温下的小气泡等温度一升高就会变大的。

ritou1985[使用道具]
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发表于 2014-6-28 13:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

胶和胶之间一般不会有气泡的，可能是浓缩胶与玻璃板之间的气泡，这样就没关系的；还有可能是你的浓缩胶凝的太快了吧，使得气泡来不及上来就凝上了，可以试试降低AP含量；我知道的也就是这么多了，呵呵

deducte[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:05 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用水压了胶的。温度15度左右。
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了，确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候，松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
大家再讨论讨论一下

tangxin_80[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

会不会是胶和玻璃板之间的气泡阿？如果是，跑电泳时用缓冲液赶跑气泡就好了。

qhyu[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

哦，用的是国产设备吗？我用的biorad mini，几乎没有遇上过这样的问题。从你的叙述来看，估计是拆封条的时候外压增加导致的空气进入胶体间所致，是不是可以通过增加等候时间来解决问题，待胶凝后多等待一会，看看如何。
折叠引用

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我用水压了胶的。温度15度左右。
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了，确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候，松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
大家再讨论讨论一下

summerxx[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用水压了胶的。温度15度左右。
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了，确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候，松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
从你的描述看，应该如四楼所言，是胶与玻璃板之间的气泡，影响不大不用理他

avi317[使用道具]
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发表于 2014-6-28 15:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我用水压了胶的。温度15度左右。
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了，确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候，松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
大家再讨论讨论一下
根据你上面的描述，我估计你用的是六一的24D型。这种槽制胶后需要一个转向，去胶条的过程。注意操作1.如果不用其他工具，打开压板的时候另一只手的拇指和食指要稍用力捏住玻璃板，向外用力撕除胶条，再放置好玻璃板，压好压板，整个过程中手不松劲；2.找一个航空票夹，就是黑钢片的那种，先夹注玻璃板，然后同上操作，不用手指使劲了，此法更好。DOOD LUCK
各位有关电泳仪器使用的事可以问我，我知道一些。