【求助】Western-Blotting全湿转膜 - 经验共享

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标题:【求助】Western-Blotting全湿转膜

caihong[使用道具]
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发表于 2014-6-28 16:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

第一不知道你的胶浓度时多大，要是小的话是可以跑出去的，转膜液就当然没有用了
第二转膜前transfer-buffer 最好是在4摄氏度先冷却一下，这样有利于转膜
第三你的转膜时间是不是要试着去摸索一下，设个时间梯度会好点

bangqi_k[使用道具]
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发表于 2014-6-28 16:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢各位的解答,告诉大家一个令人激动的消息,我做出来了.....现在把教训告诉大家 : 那就是 :::
转膜夹不紧,是因为海棉用的时间太长了,太旧了,变软变薄了,所以转膜夹不紧密,导致胶和膜不能"亲密接触",最终蛋白没有转到膜上,全掉到溶液中了,....
哈哈,原因就这么简单,费了我两个月的时间,作实验真是.......乐趣无穷啊!!!!

INK[使用道具]
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发表于 2014-6-28 16:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

恭喜楼主呀,你怎么处理得呢,是多加了一块还是两块海绵呢,还是多加了几层滤纸呀,用国产得滤纸最多可以加几层呀,多加海绵或者滤纸会不会造成电阻过大转膜效率下降呢

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