小中大1.我依据精编分子生物学实验指南配制G250,第一次做标准曲线是r平方是0.98,然后我想再次重复,结果吸光度反而变成了负值,有人告诉我可能是实验中染液受到了污染,而且操作需要戴手套,以免污染,玻璃仪器也需要酸化,是这样吗?有必要吗?如果污染的玻璃该如何处理?水洗几次可以吗?急!在线等!!!!
2 配置染液时我用双层滤纸过滤,但是率过染液不是棕色,而是淡蓝色,这是为什么?
3 考马斯亮兰必须要现配现用吗?储备液该怎么配置?储备液染色液取考马斯亮蓝G-250 100mg溶于50mL 95 乙醇中加100mL 85 磷酸不加水可长期保存,用前稀释。保存时不要过滤保存吗?用前稀释,后要过滤吗?
小妹,我很着急,各位大哥大姐快帮帮我!
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1、不用带手套,试管也不用酸化。普通洗得就行。我这么做也做到了0.99。
2、过滤后染液应该是棕色。
3、没必要现配现用,用你说的方法配1000ml,用时取就行了。
4、蒸馏水就行。
既然你第一次测结果正常,那么你的标准蛋白和考马斯亮蓝溶液都没问题,那我想就是试管没刷干净。再找一批干净的试管做做看。染液别稀释着用了,直接配到总体积,在冰箱里放1、2个月没有问题。