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标题:[未解决]样品中含有大约2g/L的硫酸钠,没用多久样品峰就出现分叉?

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ztj970831[使用道具]
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样品中含有大约2g/L的硫酸钠,没用多久样品峰就出现分叉?

HPLC分析样品中含有较高浓度的盐对色谱柱有影响吗?

如题,我的样品中含有大约2g/L的硫酸钠,在甲醇/水=60/40条件下,没用多久样品峰就出现分叉。是不是我的样品含盐量太高了?或者是甲醇不好?我们用的是国产的甲醇。色谱柱是伊利特的sinochrom-Bp,柱子被污染的话是样品污染的还是硫酸钠污染的?
很急,麻烦各位同学了。
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ttkl533[使用道具]
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2
 
看是什么盐,一般醋酸盐伤害不大,磷酸盐是柱子杀手

我的样品中含有大约2g/L的硫酸钠,在甲醇/水=60/40条件下,没用多久样品峰就出现分叉。是不是我的样品含盐量太高了?或者是甲醇不好?我们用的是国产的甲醇。色谱柱是伊利特的sinochrom-Bp,柱子被污染的话是样品污染的还是硫酸钠污染的?

1.硫酸盐我从来没用过,具体多伤柱子不是很清楚,应该比醋酸盐厉害,但是伤柱子一般都是堵柱子,压力为0,柱子堵了,所以判断不是盐的问题

2.2g/L的硫酸钠换算一下。换算成mmol/L,一般5-10mmol/L都不算太大,是毫摩尔不是摩尔

3.国产甲醇没问题,我们穷,用几十年了都没用过进口的

4.峰就出现分叉,这个原因太多,很难找出是哪一个,流动相不合适会这样,柱子太差了也会这样,还有其他可能

5.柱子被污染的话是样品污染,这个不用太担心,只要样品能溶解,用10%甲醇水冲1小时,纯甲醇冲半小时就好(不加盐)
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ztj970831[使用道具]
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我用了你说的方法洗了,不管用啊。。。
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ttkl533[使用道具]
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4
 
你的还是进口柱子呢,比我们的柱子好多了,这么高级的柱子还真没用过,样品污染不太可能是这个原因,因为污染了会莫名其妙的多出一个峰来,这是污染,峰开叉不是污染的问题,具体原因等等别人看有没有高手吧,反正我们那些一千块的破柱子经常分叉,随便折腾也不心疼
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ztj970831[使用道具]
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我的什么进口的啊,国产的,大连依利特的。。一千多,很恶心
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hplcangel[使用道具]
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我觉得是你的样品浓度太高了吧!

实在不行就反着用试试
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owoo[使用道具]
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7
 
应该根色谱柱有关,如果有条件换根柱子试试。如果只有这根柱子,建议换乙腈-水为流动相试试
根据比验,有些莫名的问题,在换用流动相体系后得到解决。
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haohaorenjia[使用道具]
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8
 
溶液是否过滤彻底?
硫酸盐会有杂质,我们用过浓度大得多的硫酸盐和磷酸盐!只要过滤和走梯度不出问题,色谱图就不会有问题!
但是使用前和使用后都是要走梯度冲洗柱子的!如果是析出结晶,不太容易冲洗!我们采用过提高柱温的办法,会将析出的结晶冲洗下来!色谱图上的毛刺会少很多!
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