蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】westernblot时公司产品说明是89kd，但我们做出...

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 18  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】westernblot时公司产品说明是89kd，但我们做出...

金丝猴[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 74570
精华 0
积分 108
帖子 15
信誉分 100
可用分 751
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
1

发表于 2014-7-5 20:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】westernblot时公司产品说明是89kd，但我们做出...


westernblot时公司产品说明是89kd，但我们作出的条带显示100kDa左右，请问这是怎么回事啊，因为是找别人帮忙做的，自己对这个一无所知，reviewer问这个问题我可以怎么解释啊？谢谢了。
顶部
bring[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74282
精华 0
积分 597
帖子 914
信誉分 100
可用分 5326
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-9
状态 离线
2

发表于 2014-7-5 20:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做个maldi鉴定一下
顶部
nikun230[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 107980
精华 1
积分 258
帖子 231
信誉分 102
可用分 1901
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-4-27
状态 离线
3

发表于 2014-7-5 20:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果是蛋白电泳的话就不足为奇，用蛋白电泳分析蛋白分子量是比较粗的，可使用质谱检测，你的蛋白分子量又有点大，不过可以试试。
顶部
baidukk[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77444
精华 0
积分 803
帖子 1226
信誉分 100
可用分 7048
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
4

发表于 2014-7-5 20:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
表观分子量和实际分子量是有差别的
因为蛋白有3，4级空间结构，有各种修饰，比如说糖基化
所以差一点是可能的，而且使用的Mark不同何mark两端的不准确性，也会导致结果有差异
顶部
金丝猴[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 74570
精华 0
积分 108
帖子 15
信誉分 100
可用分 751
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
5

发表于 2014-7-5 21:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

原来是这样啊，那我就这样回复老外应该没问题了吧？
顶部
baidukk[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77444
精华 0
积分 803
帖子 1226
信誉分 100
可用分 7048
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
6

发表于 2014-7-5 21:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你最好看看买的抗体说明书里的WB结果，负责的抗体公司应该会提供这样的文件的
最好结合ELISA,WB,IHC来确定这个蛋白质和抗体的特异性
呵呵原来还是写SCI的文章呀
顶部
金丝猴[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 74570
精华 0
积分 108
帖子 15
信誉分 100
可用分 751
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
7

发表于 2014-7-5 21:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢楼上的兄弟。说明书是89kda，赫赫，所以reviewer就提出了这个问题，搞得我头大。
顶部
baidukk[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77444
精华 0
积分 803
帖子 1226
信誉分 100
可用分 7048
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
8

发表于 2014-7-5 21:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
实验还是自己做得好，能发现问题
说明书上是蛋白得理论分子大小，如实际跑胶得时候得位置是有可能纯在差异得，所以还是要看WB得图为准，你可以去网上查查你那个抗体得资料，应该有图得，不然估计严格得编辑是不会让你pass得
让别人做总不塌实得
顶部
金丝猴[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 74570
精华 0
积分 108
帖子 15
信誉分 100
可用分 751
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
9

发表于 2014-7-5 21:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

条件所限，我们这什么都没有，也没人会做。面临毕业压力，自己做不知道要做多久才能出结果，给熟悉这方面的人最多一周就ok了，实在是没有办法，先混毕业才行啊。
还有能否请教一下为何不同样本有的显示，有的不显示条带？是否是因为同一个蛋白的表达在不同个体有所差异所至？（actin表达都是一致的）
顶部
baidukk[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77444
精华 0
积分 803
帖子 1226
信誉分 100
可用分 7048
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
10

发表于 2014-7-5 21:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

咳……现在这个招研规模和速度
真不知道是中国的喜还是忧
你的问题，问的有点含糊，不敢乱说
顶部
 18  1/2 12››