蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】]western blot 硝酸纤维素滤膜的丽春红染色

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】]western blot 硝酸纤维素滤膜的丽春红染色

fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
1

发表于 2014-7-5 22:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】]western blot 硝酸纤维素滤膜的丽春红染色


想问一下，蛋白电泳转移后，marker已经转在硝酸纤维素滤膜上了，可以看到蓝色的条带，但用丽春红染色却看不到红色的蛋白条带（丽春红染色液没有问题别人用过），想让大家帮我分析一下原因，是蛋白没有转上么？我之后的实验没有做出ACTIN 和目的带！Sad
Smile
Cool
非常感谢！Blush
顶部
eric930[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79368
精华 0
积分 722
帖子 1061
信誉分 101
可用分 6148
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-10
状态 离线
2

发表于 2014-7-5 22:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

想让大家帮我分析一下原因，是蛋白没有转上么？
应该是没有转上,胶你染了吗?
顶部
ero11[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75131
精华 0
积分 684
帖子 1028
信誉分 100
可用分 5953
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
3

发表于 2014-7-5 22:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有可能是你的胶转过了或者没有转上，可以尝试再次考染看看有没有蛋白条带。
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
4

发表于 2014-7-5 22:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

胶染了，没有条带，蛋白不在胶上了，谢谢！
顶部
jingling845[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 103462
精华 0
积分 330
帖子 380
信誉分 100
可用分 2671
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-1-11
状态 离线
5

发表于 2014-7-5 22:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有可能蛋白转过了，你是半干转吗，如果是半干转的话，试试以2mA/cm 2计算电流，在此恒电流下转30-60分钟看看
顶部
fox_79[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76205
精华 0
积分 546
帖子 691
信誉分 100
可用分 4423
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
6

发表于 2014-7-5 22:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢，是在电转液中，100v转2小时，也有短到一小时的，或者用更低的电压75v专小时！都做败了！
顶部
okhaha[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77505
精华 0
积分 548
帖子 756
信誉分 100
可用分 4651
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
7

发表于 2014-7-5 22:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我个人认为：　应该是你的　样品出的问题，好好看看是不是样品已经出序状沉淀了，导致上扬量很少，而你自己认为很多。。
顶部