【求助】GST融合蛋白诱导条件怎么摸索？

蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】GST融合蛋白诱导条件怎么摸索？

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】GST融合蛋白诱导条件怎么摸索？

mybioon[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 114475
精华 0
积分 216
帖子 171
信誉分 100
可用分 1552
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态离线

发表于 2014-7-7 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

现正在做诱导GST融合蛋白的表达，但不知道怎样的条件下表达最好，从一些文献上看到的只是他们做的结果，但我想知道具体怎么摸索最佳条件。怎么知道什么条件是最佳的。

okhaha[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77505
精华 0
积分 548
帖子 756
信誉分 100
可用分 4651
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态离线

发表于 2014-7-7 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1.同一温度(如37度),同一IPTG浓度(1nM),不同诱导时间(2-8h),看哪个时间表达量最高.
2.固定IPTG的浓度,一般终浓度:1nM,改变诱导温度,看哪个温度表达最高.
3.固定此温度,做不同浓度的IPTG诱导,看哪个浓度表达量最高.
如果有要得得可溶的有活性蛋白,较低温度,诱导时间长一点有利.
如有好结果请回帖,可以给其它站友提示提示,呵呵.
请多交流!

mybioon[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 114475
精华 0
积分 216
帖子 171
信誉分 100
可用分 1552
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态离线

发表于 2014-7-7 15:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

好的谢谢！有好结果一定和大家分享。
如果是大肠杆菌，也要探索温度，37度不就可以了吗？

gogo[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77052
精华 0
积分 821
帖子 1341
信誉分 100
可用分 7487
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态离线

发表于 2014-7-7 15:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我就是说的大肠杆菌呀.
要做温度梯度的.
good luck!

mybioon[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 114475
精华 0
积分 216
帖子 171
信誉分 100
可用分 1552
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态离线