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你确定文献中是western检测到的2条带吗?免疫沉淀下的东西SDS-PAGE也是可以看得到的。
如果确定是western检测的,那就可能是如你前所说的,加了两种抗体同时进行了检测,但这样子做可能会产生非特异(交叉反应)。我曾经做过同时将鼠源(单抗)和兔源(多抗)的一抗同时加入孵育,效果很不好,出了很多非特异带。可能,抗体顺序加入或许会好点,你可以试试。
其实,稳妥的办法(我个人认为也是标准的,呵呵)就应该是我前面所说的,用两种抗体沉淀下的复合物分别跑两个电泳,再用两种抗体分别检测。具体如下:
第一块胶:
A抗体沉淀复合物、A抗体沉淀后上清、B抗体沉淀复合物、 A抗体沉淀后上清。SDS-PAGE后用A抗体检测。
第二块胶:
同样的样品,用B抗体检测。
呵呵,仅仅是我的看法,希望对你有用。