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标题:【求助】EMSA紧急求助

tangxin_80[使用道具]
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发表于 2014-7-8 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】EMSA紧急求助


用pierce的试剂盒,核蛋白为自己抽提,用5/100的胶,但为什么蛋白总留在加样孔呢?游离探针已经跑到胶底了.
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发表于 2014-7-8 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没碰到到过,我是用的6.5%的胶,用viagene公司的做NFKB,你呢! 可以讨论讨论
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发表于 2014-7-8 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

另外,你怎么知道蛋白留在空里了,如果没有结合上只能看到探针,看不到蛋白的!
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发表于 2014-7-8 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的核蛋白是自己抽提的,探针量和蛋白量都调试过了,4%的凝胶也用过了,还是在加样孔里.蛋白和探针是结合了的,显影的时候可以看到的啊,真急啊
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发表于 2014-7-8 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那个反应是生物速标记在探针上,探针和蛋白结合,HRP和探针上的生物素反应发光,然后显影, 结合上没有只能通过阳性对照来判断, 而无论结合上没有检测的时候探针总是能自显影得!
跑不动我觉得还是你的胶又问题, 你可以配置6.5% 的胶,然后用别的蛋白加样调试一下,然后在正是做,不然会很浪费盒子得耗材,做一做就不够用了! 呵呵
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发表于 2014-7-8 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢,我再调试看看
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发表于 2014-7-8 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
为何蛋白跑不进凝胶?
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