小中大【求助】关于SDS丙烯酰胺电泳的问题
各位前辈老师们,我是刚毕业的学生,现在在做SDS电泳,之前也不断的出现过许多问题,但是从丁香园的帖子里学到很多知识,把问题一个一个都解决了,可是最近出现了一个问题,我改变了几乎所有可以改变的条件后问题仍然没有得到解决,所以我来到这里,希望可以有前辈老师或者高人给我一些指导和意见,帮助我早日解决这一问题!我现在跑的电泳是浓缩胶50V 30分钟,分离胶120V至电泳结束,其它都是按书上要求的做的,现在问题是我跑完的胶只能看到25万的那条蛋白条带,18.4W的那条带就几乎正好和溴酚蓝重合了,几乎看不到,而我们最需要看到的14.4W的那条带就完全看不到了。其实以前我跑分离胶用的是150V的电压,现在改成120V了也还是看不到14.4的蛋白条带!下面我附上的图前面2张是之前在这里工作的师姐跑的电泳图,她跑的很漂亮14.4W那条可以很清楚地看见,而后面两张图是我最近跑的电泳图,就只可以看到18.4W的那条。希望前辈高人们可以给我点指导,提点意见!