PCR仪

谢谢指点
让我豁然开朗

那是不是sybr染料主要就是对应于b虑光片呢
分析主要用b虑光片的荧光值？

还有，用不同的试剂盒，作出来的Tm值有些会差距1度左右
请问这是怎么回事，产物应该是同一个
我用takara和普通的pcr试剂盒做出来是一样的
但是用理生的real试剂盒做出来是少1度的
觉得有些奇怪

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这位老兄好像做的很多是硬件方面的。不知道你用的是什么机型，俺也学学，毕竟我用的仪器也不多。那个滤光片，你可以看一下操作手册。

Tm值有一度的变化可能原因在于试剂盒的组成不同，离子浓度不同，对Tm有一定的影响。

我刚准备做定量，请教一下
　　１不知道伯乐的机子怎么样？
　　２请推荐几个合适的ＳＹＢＲ　ＧＲＥＥＮ的盒子，１０００以内的（没钱不好办啊），我大约做２０个样，谢谢
　　３现在对ＳＹＢＲ　ＧＲＥＥＮ认可吗？
预先谢谢！

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1、伯乐的机子不错。
2、takara的试剂盒，大概在1500元，400个反应。
3、大部分人做还是用sybr green I的。这是最常用的染料。

基线就是背景值，因此就是曲线在没有“起跳”之前的一段。在软件上有一个地方可以输入
baseline从第几到第几cycle作为基线。设置原则是使没有起跳之前最多的cycle的信号接近0。

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您好。先谢谢你。
不过，基线在软件上是可以自己手动拉的。很少有去设置具体的循环数。
因为在定量PCR中，基线的位置关系到CT值，而我对基线的定位却十分模糊，更本不知道怎么去确定基线的位置。所以请大侠能详细一点，或者能给个具体的例子吗？

您好。先谢谢你。
不过，基线在软件上是可以自己手动拉的。很少有去设置具体的循环数。
因为在定量PCR中，基线的位置关系到CT值，而我对基线的定位却十分模糊，更本不知道怎么去确定基线的位置。所以请大侠能详细一点，或者能给个具体的例子吗？

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不知道你用什么仪器？基线的设置我用过的都是输入数字的，手动拉的是thresthold。你是不是概念错了？基线的设置我上面应该说清楚了。