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标题:【讨论帖】引物质量直接影响PCR结果!

bling[使用道具]
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宝生物的还可以的,我以前一直用,生工上海的,还可以,只是有的时候脱盐不够好,不过总体还是不错的
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huifeng0516[使用道具]
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我们用的是北京奥科的,不知道,反正我做的结果不是太稳定(同样体系和条件)
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wood533[使用道具]
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我们用的是北京奥科的,不知道,反正我做的结果不是太稳定(同样体系和条件)
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mamamiya[使用道具]
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刚收到的,建议大家看看,了解一下引物合成的现状.

cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&amp');id=5210950&sty=3&keywords=oligo+6
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shenkunjie[使用道具]
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塞百盛合成的引物还可以,我也一直用着,可以少量试试
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ritou1985[使用道具]
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大连宝生物的引物也不稳定,我有一次合成7管,其中6管是空白,没有任何产物。呜~~~~~~~

cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&amp');id=5210950&sty=3&keywords=oligo+6
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yjf1026[使用道具]
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^_^,有这么多相同遭遇的朋友,再苦,也得到安慰了!!
请浏览这篇文章:《多对引物合成错误造成严重损失》cuturl('http://www.microbiology-sd.cn/bbs/context.asp?id=246')
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雪花子[使用道具]
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其实有时候大家合成引物默认是5OD,我在sbs合成都是说的2~5OD,有时候就是给我5OD,有时候少一些.但是这样比较能够保证质量.
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tuuu2[使用道具]
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看了大家的情况,真是找到了一大堆知己啊,
我最近就是一直出现这个问题,刚开始还能扩的出来,怎么换了一批引物,就不停的出现脱尾,没有条代等情况,原来同一批的货,还有可能有不同的情况,看来要赶快换引物了,谢谢大家了,,,唉,真不知道该怎么说中国的这些试验水平
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yjf1026[使用道具]
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20
 

我们实验室当时选引物合成公司时,选了赛百胜、奥科、博雅三家公司。只有赛百胜是提供毛细管检测服务的,但每条收取100元的检测费,但它们公司说保证大部分的引物纯度都能达到90%以上。我们选取了6条引物同时让这三家去合成,博雅和奥科的都还可以,但是赛百胜公司给我们的6条引物却只有2条达到了标准,无奈他们只有重合,并且把重合的引物全部做毛细管检测,但可惜的重合了2、3次是最终那4条也还是没有能达到标准。我们就放弃了赛百胜。接着我们又拿了40条引物去博雅和奥科分别合成,比较两家公司的合成效果,总的说来博雅要比奥科合的效果相对好一些,有些引物博雅合成的就扩出来了,奥科合的就出不来。我们就选择了博雅合成引物。但并不是一点问题都没有,他们公司合的引物稀释后根本就存放不住,很多引物稀释保存一段时间就扩不出来了。我们也弄的很郁闷!5年前,我们的引物都是在上海生工合成的,那时候他们合的引物质量非常好,管底特别干净,无杂质沉淀,有的引物我们存放了2、3年都没有问题。可现在不行了,引物合成拿过来一看,有的引物管底脏的不行,一大团黄色沉淀,而且引物存放不住。不过,我还记得2年前我在生工用dHPLC纯化方法合成的引物效果还是相当不错的。就是价格太贵。如果不是筛选引物而是做检测什么大量用引物可以考虑用dHPLC纯化方法,或者拿到国外合。过几天我要做下实验比较一下咱们国内的引物和国外引物合成的差别。象我们现在合荧光标记引物,大量合成60OD价格与国内相差不大了,而且质量有保证,存放时间也要长1~2年。现在引物的质量对我们的实验也造成了很大的干扰。
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