小中大我是一个新手,想问一下我手头已有提好的血标本的DNA,要测某个基因的SNP位点,想用酶切的方法做。想请教一下,我一共要准备哪些试剂,怕到时东西不全,实验时间会影响,谢谢哪位高手指导!
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第一步:PCR扩增,需要Taq酶、缓冲液和Mg离子(Taq酶会送),dNTP,ddH2O,引物1对(需设计,找公司合成)
第二步:check PCR产物,琼脂糖电泳或PAGE电泳,前者简单,建议使用,需要琼脂糖;需EB或类似的荧光染料
第三步:内切酶及缓冲液(设计好酶切位点)
第四步:读结果,需电泳,与第二步类似
可能要的仪器:PCR仪、凝胶成像系统、电泳漕及电源
另外,不是每一个位点都可以用酶切做的,不建议设计错配引物,不好做,酶太贵也不合算