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标题:【转载】【讨论】transwell肿瘤侵袭实验的吉姆萨(Giemsa)...

junhun[使用道具]
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我想请问大家在小室上层铺的都是什么包被液,Fibronection,胶原,Matrigel还是其他的东西,浓度和体积大概是多少?
还有请教一个问题,为什么小室要染色,直接计数小室下表面的细胞不可以吗?最后计数是只计数染上色的细胞,还是小室下表面所有的细胞?多谢。
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zwsyrt[使用道具]
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请问做这个大约需要多少钱,谢谢
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hold住[使用道具]
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相关疾病:
乳腺癌
blueflyer应该是HE染色吧,而且细胞有点像是乳腺癌细胞
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jujuba[使用道具]
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我看国内有卖Matrivgel,和BD的matrigel有区别吗(从说明上看好像挺相似),不知有有用过的战友吗?
MATRIGEL Basement Membrane Matrix
is a solubilized basement membrane preparation extracted from the Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) mouse sarcoma, a tumor rich in extracellular matrix proteins. Its major component is laminin, followed by collagen IV, heparan sulfate
proteoglycans, entactin and nidogen.It also contains TGF-beta, fibroblast growth factor, tissue plasminogen activator and other growth factors which occur naturally in the EHS tumor.
Matrivgel
本公司生产的Matrivgel是从小鼠肿瘤中获得的可溶性的基底膜提取物,富含细胞外
基质蛋白。其主要成份是laminin、胶原IV、 entactin、硫酸肝素糖蛋白,它还含有TGF-β
、 bFGF、组织纤溶酶原激活物(tPA)和其他一些生长因子。
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sunbent[使用道具]
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可以用苏木素染色或是中性红染色,背景干净,非特异吸附少
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sunbent[使用道具]
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应该先用多聚甲醛固定再擦掉上室中的细胞,否则下室细胞长时间离开培养基会死亡
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yyaxw84[使用道具]
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有没有试过用醋酸抽提,酶标仪测OD值,间接读取的?
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chengjie79[使用道具]
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我也染过transwell,感觉这个实验还是相对比较好做的~~ 附图

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感觉blueflyer用的是HE染色 应该是迁移实验 迁移实验很简单
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chengjie79[使用道具]
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有没有试过用醋酸抽提,酶标仪测OD值,间接读取的?

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结晶紫染色可以
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txwuyan[使用道具]
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楼主,请教一下你做实验时下室加多少液体呢?下室的液体是不是会通过膜很快渗透到上室中呀?我看介绍说24孔板是加500ul,可是我今天做了,发现加了500ul时整个膜浸泡在下室液体中,刚把小室放进去上室内马上就进入了下室的液体,那上室细胞不就完全浸泡在下室液体中了吗?用基培稀释还有什么意义呢?我根据自己的理解觉得下室液体应该刚好与膜相接,您觉得我的理解正确吗?
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