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标题:【转载】【讨论】transwell肿瘤侵袭实验的吉姆萨（Giemsa）...

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发表于 2014-8-2 10:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想做HUVEC的transwell细胞迁移实验，请问transwell小室膜径及孔径多大为好，那里买的，，多少钱。谢谢
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如影随形[使用道具]
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发表于 2014-8-2 10:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问,用transwell小室检测细胞迁移性，transwell小室规格（膜直径、膜孔径、）多少为好？如costar贵吗。没做过，请高手赐教，谢谢了
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whitesheep[使用道具]
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发表于 2014-8-2 10:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也来发下我做的图片，（×40）


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发表于 2014-8-2 10:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

想问下，收集跨膜细胞荧光标记进行定量可以用什么方法？
还有就是怎么收集啊？
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发表于 2014-8-2 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最近做共培养，现在很是郁闷，细胞接种后根本看不到膜上的细胞，我需要观察共培养时细胞诱导分化的影响，也就是细胞的形态变化，大家有这方面实验经历的给我点建议，corning或者millipore的那一款产品比较适合啊？不甚感激！
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发表于 2014-8-2 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我今天用1;4 稀释的Martrigel胶铺好transwell小室了，但是发现细胞不够要后天才能做，可以保存两天吗？4°还是37度？
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发表于 2014-8-2 10:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

好像都没有人回答了哦，我也还是想咨询一个问题。小弟还没有开始做，想请教的问题也比较弱，还望不吝赐教。我是做肿瘤细胞的侵袭实验，1、24孔板内，上下室的培养液各加多少ul？2、24孔板的小室内一般加入多少细胞？3、准备用结晶紫染色，我看有的说不用固定，有的说要固定，有没有做过的大侠给个建议？4、结晶紫染色后醋酸脱色做间接计数的，觉得应该要计算掉落到下室内的细胞，那么醋酸脱色的具体流程有没有啊？多少33%醋酸？脱色多长时间？
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发表于 2014-8-2 10:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你好，我最近要做肿瘤细胞的侵蚀实验，请问用什么类型的transwell小室呢？Transwell嵌套行吗？transwell小室还有铺胶吗？请指教，谢谢！

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我也想问这个问题，还有设计多少孔才合理，不知道怎么做统计推算？各位前辈请指教，谢谢！
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发表于 2014-8-2 10:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是啊，看了大家的讨论，我也觉得奇怪，8um孔径的小室1ml或者500ul的液体，上室不渗入下室的液体才怪呢，希望有人能解答我的这个疑问，谢谢！

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corning 的transwell板的说明书上不是有上下层加培养基的量吗？你们自己都不看看么？
24孔板上层是100ul,下层是600ul
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发表于 2014-8-2 10:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
补上昨天的染色结果（附图）
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个人感觉穿过去的细胞染色较浅，且轮廓不清，影响计数，估计跟Giemsa染液放置太久有关，2002年配制的，此外，染色时间有必要延长至30min，请大家批评指正：
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你可以买瑞氏-吉姆萨复合染液直接染，避免了配置染液的麻烦。而且你好像没有用pbs分色，用pbs分色后可以使得核和胞质明显区分。
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