小中大具体的方法：（我曾经在硕士时养过二百瓶左右，有问题尽管问）
原代培养：
清洁级180-220g SD大鼠，断头处死，无菌操作取一段胸主动脉，洗去血液，去除外膜纤维脂肪组织，用眼科剪纵行剪开血管，刀片刮血管内膜2~3遍，然后将血管切成约1mm2大小碎片，分装贴入培养瓶中，加入含10%小牛血清的DMEM培养基，倒置3~4小时后翻转，于37% 5%CO2的细胞培养箱中静置3天(静置期间不许震动或移动培养瓶, 以防刚贴壁的组织细胞块脱落)，然后每2天换液。一般4~7天左右平滑肌细胞从组织块中爬出，2~3周出现致密细胞层。 待细胞快融合时用0.25%胰蛋白酶消化传代，取3-8代细胞做实验。
细胞传代：
将原代细胞培养瓶中的培养液吸出, 加D-Hanks液到瓶中清洗细胞表面2次。弃掉清洗液， 加入0.25%胰蛋白酶1.0 ml, 将消化液均匀覆盖细胞表面，消化时间为2~4 min。这时在倒置显微镜下观察, 可见细胞成片皱缩变圆，细胞边缘折光增强。在细胞未脱落前倒去消化液，立即加入血清或含血清的培养基以终止消化。然后用滴管将细胞从培养瓶壁上轻轻反复吹打下来。然后根据细胞密度, 以1: 2~4分瓶培养。每2~3天换液, 待细胞生长到接近融合时(一般为7~10天)再传代。
注意要用Actin来鉴定一下，不然人家不信你的。
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请问你的DMEM是高糖还是低糖的阿？
