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标题:【求助】流式细胞仪 检测细胞周期

jujuba[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

发表一点愚见：看了你的图结果发现你的结果中CV值好像大，这样不太好吧！？
评价仪器精度的重要指标是仪器的变异系数(CV)，对于校准样品，其CV值越小越好，CV值越小，说明仪器校正的精度越高。校准样品包括非生物样品(荧光微球)和生物细胞样品( 人淋巴细胞、鸡红细胞等) 。目前，非生物荧光微球已有商品试剂，CV一般<2％-3％。
附上一个关于细胞流式的文件。
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idea2011[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果要进行DNA分析，应采用线性信号，此时对CV值要求较高，不是一般荧光检测的3%以内，而应该在laser alignment时严格校准在2%以内。
应用标准微球我一般要将CV值校准在1%左右才做DNA分析。
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发表于 2014-8-2 18:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


一对样本的5%到10%的变化是不足以说明问题的。如果一百对样本都是5%到10%的变化就可以说明问题。
当然不是要你去做100次重复试验，而是说在少样本对照时如果差异足够大，那么样本数可以很少，但是如果像你这样的数值变化幅度，需要很大样本量才有说服力。这其实是统计学的基本原理。
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jujuba[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

转染后比转染前凋亡率降低了，可以这么说吗？
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jujuba[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
考虑不周全，试验设计问题。后悔晚矣
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leifengta[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
发表一点愚见：看了你的图结果发现你的结果中CV值好像大，这样不太好吧！？
评价仪器精度的重要指标是仪器的变异系数(CV)，对于校准样品，其CV值越小越好，CV值越小，说明仪器校正的精度越高。校准样品包括非生物样品(荧光微球)和生物细胞样品( 人淋巴细胞、鸡红细胞等) 。目前，非生物荧光微球已有商品试剂，CV一般<2％-3％。
附上一个关于细胞流式的文件。
大家共同讨论！
......

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测定DNA周期时，将CV值调整到需要的范围是件很难的事情，具体措施都是什么呢？
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jujuba[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

复杂的东西，要是能有个专门的人辅导一下就好了
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
laser alignment就是照操作规程调整光路就是了，没有什么复杂的。要说困难，可能就是有时候光路偏移较大，要有耐心多花点时间就是了。
下面是今天晚上实验前校正光路的结果，耗时10分钟。


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2014-8-2 18:25
90504909.snap.jpg (45.31 KB)
 
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junhun[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

本人菜鸟一个！随便搭车问问高手，我近期检测细胞周期，发现对照组与试验组S,G1期的变化不显著，但G2期试验组比对照组显著增高，是说明阻滞在G2期了吗？还应该怎么解释呢？可以简单的理解为处理组的细胞增值抑制了吗？
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newway[使用道具]
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发表于 2014-8-2 18:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
应该是阻滞在G2/M期。
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