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标题:【求助】在纯化过程中哪一步能大量除去内毒素?

六个梦[使用道具]
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原帖由 glass 于 2014-8-9 23:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不知道你的蛋白是怎样的,一般低电导偏碱性pH下,用阴离子的流穿模式去除内毒素的效果非常好的。一般我们的样品经过这一步后,内毒素都及格。阳离子的结合模式也能较多的去除内毒素,但是比较关键的是你每步所用的器具都应 ...

请问下在纯化过程中对水源有要求吗?是否非要用注射用水?我们一直用的是高纯水,内毒素<0.001EU/ml。
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greenbee[使用道具]
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我们用的也是超纯水,但是内毒检测是没有的(低于试剂最低检测限),所以有点好奇你们的内毒检测是怎样操作
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zhenxin[使用道具]
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你每一步操作都留样检测一下内毒素,然后就知道你哪一步去除内毒素最多了。我记得我们有个产品亲和层析这一步内毒素去除最多。
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六个梦[使用道具]
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我们用的也是超纯水,但是内毒检测是没有的(低于试剂最低检测限),所以有点好奇你们的内毒检测是怎样操作

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我们是用湛江安度斯的鲎试剂(凝胶法)灵敏度0.25EU/ml半定量检测,也用过显色法(Thermo的)定量检测。你们的试剂检测限是多少?
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greenbee[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 六个梦 于 2014-8-9 23:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我们用的也是超纯水,但是内毒检测是没有的(低于试剂最低检测限),所以有点好奇你们的内毒检测是怎样操作

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看来都是差不多的,我们也是安度斯,但是这个灵敏度0.25的怎么能检测到小于0.001的结果呢(
即便是定量法鲎试剂 最低检测限也是0.005 EU/ml吧)
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六个梦[使用道具]
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0.001是超纯水的出水标准不是我们检测的,我们定量检测PBS内毒大约0.03EU/ml
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jingling845[使用道具]
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层析三部都能除去内毒素,考虑哈填料CIP、SIP是否有效
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XYZQ[使用道具]
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楼主的蛋白等电点较高的话,可以考虑使用阴离子流穿模式,对去除内毒素的效果较好
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baidukk[使用道具]
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还是要从源头开始注意
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