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标题:【求助】有机酸分离条件

+小生怕怕+[使用道具]
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发表于 2014-8-19 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】有机酸分离条件

偶是新手，需分离酒石酸、草酸、苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、乳酸、乙酸、马来酸。柱子是C18；流动相是15mmol/L KH2PO4,pH=2.24，流速0.5ml/min；紫外监测器214nm；进样量
5ul 。参考文献分离很好，可是我的几乎分不开，且峰宽，有拖尾。请高人指点，如何能很好分离这几种有机酸？多谢！
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mingming0638[使用道具]
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发表于 2014-8-19 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
减小进样量。
加一个预柱。
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耗子===[使用道具]
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发表于 2014-8-19 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
感觉楼主使用的缓冲液浓度太低，可能无法保证样品的形态完整性，建议试试50mM～100mM的缓冲液···
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vera+[使用道具]
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发表于 2014-8-19 17:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1、流动相中还需要加3%左右的有机溶剂如甲醇。
2、pH 2.24，偏低。
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woshiduiyan[使用道具]
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发表于 2014-8-19 17:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
为什么不用气相做呢？
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toy[使用道具]
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发表于 2014-8-19 17:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
色谱柱：C18，250mm×4.6mm，5um
流动相：0.1mol/LKH2PO4溶液（pH3.0,磷酸调节）
流速：1.0ml/min
检测波长：215nm
进样量：10ul
柱温：27℃
这个条件应该可以的，我的分离效果很好，时间12min足够。
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viviwang1987[使用道具]
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发表于 2014-8-19 17:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
为什么要在盐水流动相里加3%的有机溶剂呢？这是什么原理？
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