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标题:[未解决]用液相分析生物样品时,色谱柱该如何冲洗较好

  [未解决]本主题悬赏 可用分 20  
thereyoube[使用道具]
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用液相分析生物样品时,色谱柱该如何冲洗较好

如题,先谢了。
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pogo2die[使用道具]
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生物样品,重在钱主力,一定要除点蛋白和各种可能堵柱子的颗粒,冲洗和一般的差不多
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  • miracle   2008-8-27 10:45  专家分  +8   说得不错!
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johntancy[使用道具]
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楼上说的是对的。主要还是除蛋白,我们现在也做生物样品,最麻烦就是除蛋白。洗的话还是乙腈、水反复多冲洗就行了。
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  • miracle   2008-8-28 17:36  专家分  +8   感谢支持!~
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wtz010[使用道具]
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建议您还是用您的流动相进行冲洗,我一般是进2针空白试剂进行冲洗,然后再进行去盐冲洗和有机溶剂保护。

关键是要加预柱!
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  • miracle   2008-9-1 09:27  专家分  +5   建议不错!
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jenny0121[使用道具]
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冲洗时可以加一点酸,小流速慢慢冲,也有效。
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  • miracle   2008-9-1 09:27  专家分  +5   建议不错!
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vvyouttjean(user00)[使用道具]
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michael_b_rex[使用道具]
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我说说进完生物样品后,每天常规的清洗方法(反相柱):

1 如果你用的是酸性流动相,可以用甲醇或者乙腈冲洗。甲醇可以小流速冲洗过夜,乙腈可以高流速冲洗二十分钟至半小时,然后用小流速甲醇过夜。一般来说,由于乙腈极性比较小,所以冲洗比较干净。

2 比较好的冲洗方法是用纯水作为水相进行梯度洗脱。洗脱时间习惯上半小时左右,从80%水相开始到100%有机相,洗两次。

3 如果用碱性流动相,用纯水代替含碱的水相,冲洗一段时间,将碱性流动相完全替出后,再用纯有机相冲洗。

二楼说的用流动相洗,如果反相液相的流动相中水相比例较高,可能有一些极性大的基质物质挂在柱子上下不来,时间长了柱压就会升高;而且有的时候流动相含盐量比较高,所以用流动相冲洗不一定是最好的办法。
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