液相色谱 » 讨论区 » 分析百问 » 液相色谱 同一样品用不同方法测结果会差很多吗?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[未解决]液相色谱 同一样品用不同方法测结果会差很多吗?

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
caiyaqi[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 49543
精华 0
积分 101
帖子 1
信誉分 100
可用分 668
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-11-4
状态 离线
31
 
不同的分析方法对同一样品的测定结果又是会相差很大,这种情况非常常见,尤其是一些未经过充分检验的所谓新方法,这就是为什么人们往往还在使用一些看似非常老的方法,而不愿使用一些新方法的原因之一,因为这些老方法是经过大量的实际检验的。
产生不同方法差别大的原因很多,其中最主要的是不同体系之间的系统误差;还有不同方法抗干扰的能力不同。
顶部
robby10000[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 49546
精华 0
积分 101
帖子 1
信誉分 100
可用分 668
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-11-4
状态 离线
32
 
据我所知,是有可能的,比如测定药品中的API含量,使用液相方法和滴定方法得到的结果可能会有一些差异的。
顶部
yxp[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 49547
精华 0
积分 101
帖子 1
信誉分 100
可用分 668
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-11-4
状态 离线
33
 
我认为是否会出现较大的差异视检测方法而定,不同方法的精度以及实验原理的不同导致的实验结果会出现差异。放射性免疫测定法是将放射性检测的灵敏度和免疫反应的特异性结合在一起,反应需要抗体、放射性抗原(标记抗原)和无放射性抗原(待测抗原),在一定环境和条件下,抗原抗体反应达到平衡,抗体上结合的标记抗原和待测抗原的量成反比。测定标记抗原-抗体或标记抗原放射性可推算出待测抗原的数量。该方法灵敏度很高,但无法检测具有生物活性却失去免疫活性的物质,因此与生物和高效液相等测定的结果会具有较大的差异。同时,由于标记抗原和待测抗原是竞争性反应,被测物和标准物质都不能全部参加反应,测得的结果是相对量不是绝对量。
高效液相色谱定量是根据与对照品的对比,通常是以峰面积或峰高为基础,进行外标法和内标法的定量。它通过不同的流动相将供试样品带入色谱柱内,在柱内将各成分分离后依次进入检测器。因此,进样量的准确性、流动相的选择、色谱条件、检测器的稳定性和线性范围等均会影响检测结果,若含量值超出检测器的线性范围,则检测结果就会有较大的偏离。因此,实验结果是否出现差异还要看实验操作者的技能。
这是我们叶子弘教授针对这一问题的回答。
顶部
sclbj[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 33393
精华 0
积分 2178
帖子 19
信誉分 100
可用分 705
专家分 4
阅读权限 255
注册 2010-2-7
状态 离线
34
 
我看了论坛中的一些讨论,我只对液相比较了解,我认为只要通过方法学的考察,证明该方法是符合要求的,而且检测规范,结果应该是一致的。

关于同一样品用不同检测方法,检测结果是否会相差很大的问题的原因在于:该检测方法没有进行完整的方法学考察。
本帖最近评分记录
  • miracle   2010-11-4 14:01  可用分  +2   欢迎参与技术讨论!
  • miracle   2010-11-4 14:01  专家分  +2   欢迎参与技术讨论!
顶部
yuhm[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 49549
精华 0
积分 101
帖子 1
信誉分 100
可用分 668
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-11-4
状态 离线
35
 
当然是可能的。这和该样品的含量和采用的方法的适用检测限以及误差范围等有直接关系。
  如果待测样品的含量是微量,就必须首先选择合适的方法;同时做好标准曲线和严格的对照。否则,很容易出现波动很大的假阳性结果。此外,不同方法根据其机理和操作步骤,也具有不同的误差限。
  当然,正常情况下,如果不同方法的检测限都合适,分析检测的步骤也不会引入大的误差,那么不同方法测出的结果应该相差不大。
顶部
grc7636[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 42267
精华 0
积分 103
帖子 5
信誉分 100
可用分 676
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-7-13
状态 离线
36
 
经常存在这种情况。可能有以下原因:
  1 由于专一性不同。放免法或酶免法专一性低,对于生物样本,所测结果可能为原形或代谢物之和(相同或相似标记部位),结果偏高,而色谱法根据标准物质定量,更专一,结果偏低。环孢菌素A两种方法测定结果存在显著差异。
  2 由于操作误差。不同实验室、不同人员存在的操作误差,也可引起结果的不同。通常可借助室间或室内质量控制消除这种误差。有些情形,相同测定方法也可能存在这种误差。同一测定方法、相同给药剂量不同实验室药物血浓度存在差异常见于文献。引起这种误差的原因较多,如制剂、试剂、对照品等,需分析具体原因。
3 但同一实验室,相同实验条将,如出现较大误差,则完全由操作误差引起,不被认可。
顶部
liuping050[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 39048
精华 0
积分 116
帖子 4
信誉分 100
可用分 676
专家分 2
阅读权限 255
注册 2010-5-31
状态 离线
37
 
肯定是会有所差异:
1、方法检测范围、灵敏度等方法误差
2、标准样品的区别
3、仪器的检测器等性能
4、样品处理过程也有可能不同
5、检测过程中因仪器不一,进样量等因素
以上都有可能会引起一定的差异
顶部
sclbj[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 33393
精华 0
积分 2178
帖子 19
信誉分 100
可用分 705
专家分 4
阅读权限 255
注册 2010-2-7
状态 离线
38
 
如果所检测的样品都能用适用所选用的检测方法,关键点在于不同方法必须按照该方法进行样品预处理及方法设置,如果这几个方面没有问题,检测结果不会相差很大的。
顶部
zzxiong608[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 49554
精华 0
积分 101
帖子 1
信誉分 100
可用分 668
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-11-4
状态 离线
39
 
这个问题不好说,如果同是定量分析方法,如LC法和GC法,对同一样品的测定从理论上说应是完全相同。但在实际中,可能由于不同方法,样品对方法的干扰程度不同,测定结果就可能不同。因此,应考虑样品对测定方法的干扰,在样品不存在因素时,按规范要求测定,不同方法的测定结果应一致。不知是否准确,这是我的理解。
顶部
wwgwang[使用道具]
二级
Rank: 2


UID 49555
精华 0
积分 101
帖子 1
信誉分 100
可用分 668
专家分 0
阅读权限 255
注册 2010-11-4
状态 离线
40
 
检测结果可能会相差很大!
顶部