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标题:[未解决]液相色谱 同一样品用不同方法测结果会差很多吗？

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shiguoqing[使用道具]
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发表于 2010-11-4 14:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
关键是选用的标样. 如果标样的定值准确的话, 二者应该不会有太大差别. 当然, 放免法的系统误差一般比HPLC大，所以二者检测结果有一定偏差是正常的。另外，如果样品中有杂质干扰HPLC或放免测定的话，就会造成检测值有很大差异。
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chebaoquan[使用道具]
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发表于 2010-11-4 14:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可能会有很大差异。

任何检验方法都有适用范围，建立方法要进行线性关系、专属性、回收率、检测限等实验，不同的方法由于专属性、灵敏度、精密度存在差异，结果可能有很大不同，尤其在微量成分分析方面。
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jinhao[使用道具]
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发表于 2010-11-4 14:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
色谱法其实是一种分离方法,传统上是利用物质在两项中吸附或分配系数的微小差异,达到分离的目的.当两相作相对运动时,被测物质在两相之间进行反复多次的分配,使得原来微小的分配差异积累到可以分离的程度.所以色谱作为一种分析方法,其最大特点在于能将复杂的混合物,分离为各个有关的组成后,逐个地加以检测.

放射性免疫法radioimmunoassary(RIA)与high performance liquid chromatography (HPLC)高效液相色谱法相比,多用于生化物质的分析检测.

就同一样品来说,用不同方法检测,如果不考虑仪器误差和精度的话,应该没有差异.

但是,凡事都是有利有弊的,对某一样品,可能用HPLC来测更方便快捷更经济。用RIA或许繁琐一点。但精度等方面，还是要看仪器操作条件等的选择，比如柱子的型号和柱温等操作条件等。

打个通俗点的比方：测量一根筷子的直径，你可以拿一把尺去量，也可以用游标卡尺，也可以用螺旋测微器。同样属于长度测量，精度会不同，看各人的要求了。 如果做扫描电镜，拍照后测照片里的长度，那精度更高了。
但是不同方法，你用尺子量，跟用普通相机拍照后拿尺量，两者的误差就不大了。
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发表于 2010-11-4 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
从专业角度看 ，使用不同的分析方法对同一种样品进行相同项目的分析测试，如果测试操作严谨，原则上结果不应该差别太大,但会有一定的误差。关键是要用标准物质对分析方法的可靠性确认后，才能比较不同分析方法的结果。
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majinfei8[使用道具]
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发表于 2010-11-4 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 qyu111 于 2010-11-4 11:46 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
这个问题问的不专业。应该说明是什么样品，要检测什么。从原则上来说，同一个样品检测同一种指标或性质，不同方法检测的结果应该是一样的。对一个样品用不同的方法来检测不同的指标，结果当然会不一样。 ...

我用以上两种方法测定血浆和尿中的儿茶酚胺。
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发表于 2010-11-4 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 hwliu 于 2010-11-4 12:05 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
样品如果是稳定的，那么用不同的方法检测同一样品时结果应该差别很小。但有时由于不同方法的实用性有所不同，样品的基质不同，有可能不同方法所得结果差别会很大。
这个问题的答案应该是针对具体样品和具体方法来回答，但是， ...

我用以上两种方法测定血浆和尿中的儿茶酚胺。放免法采用的是试剂盒，HPLC采用固相萃取法进行样品预处理。
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发表于 2010-11-4 15:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

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原帖由 liuwei 于 2010-11-4 13:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
具体问题具体分析。高效液相技术比较灵敏和稳定，放射性免疫法就不如它好，和操作者的操作关系很大。你说的差很多，具体是多少呢？我觉得这个得看实验设计，如果实验路线科学合理，2种技术得到的结果都会是正确的，当然可能HPLC的 ...

谢谢解答
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发表于 2010-11-4 15:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

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原帖由 lyyy-0 于 2010-11-4 13:23 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
同一样品用不同的检测方法，结果确实会有很大差距。所以不同的方法，设立的标准范围是不同的；标准是根据方法定的。每一种方法相差多少，这要根据你所用方法及这种方法检测积累众多样本数的结果，还需通过不同实验者、不同实验 ...

请问您知道采用放免法和HPLC法测定血浆中儿茶酚胺设立的标准范围是多少吗？哪里可以查到参考值，谢谢。
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发表于 2010-11-4 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

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原帖由 yxp 于 2010-11-4 13:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我认为是否会出现较大的差异视检测方法而定，不同方法的精度以及实验原理的不同导致的实验结果会出现差异。放射性免疫测定法是将放射性检测的灵敏度和免疫反应的特异性结合在一起，反应需要抗体、放射性抗原（标记抗原）和无 ...

谢谢叶教授的回答
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发表于 2010-11-4 16:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #34 sclbj 的帖子

我采用的是HPLC法，是经过方法学确证的，放免法是我同事做了好几年的，一直用它测临床样品
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