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标题:[未解决]液相色谱 同一样品用不同方法测结果会差很多吗?

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
majinfei8[使用道具]
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看了各位专家的解答,发现没有一个定论,是不是只要我的方法学可靠的话我就可以忽略这个误差的存在呢?
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huabingzhang[使用道具]
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回复 #1 majinfei8 的帖子

分析原理根本不一致,分析目标也没有指出,HPLC是一种分离分析方法,若使用uv等检测器还依赖于待测无官能团。

放射性免疫法是一种基于抗原抗体结合的放射标记生物测定法,特异性好,依赖于待测物的抗原抗体结合的情况。

如果仅说不同方法测定同一供试品,而供试品又不说明,其测定结果也是无法说明的。
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tdbjhn[使用道具]
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楼主的意思是两种方法的检测结果是否有差别,我告诉你:不一定。很多专家已经说了一些了,我要讲以下几点:
1、同一个样品,同一检测项目,结果肯定不会有大的差异。如果有,肯定是方法本身有问题,诸如液相分离不佳、样品提取不完全、杂质的干扰、仪器的不稳定、环境影响等。
2、同一个样品,同一项目,要验证方法的准确性,可以使用两种原理不同的检测方法。如动物源性食品中的链霉素残留HPLC测定,你可以用ELISA方法或者LC/MS/MS 方法测定,如果三种方法结果在误差范围内,那么这三检测方法就是准确的,否则,至少有一个方法不准确。
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Wendy-Zhang[使用道具]
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各种分析方法都有它的检测灵敏度以及适用的范围,根据分析要求的不同可以选用不同的检测方法。不同方法检测同一样品的结果有时是有差异的,有时是相近的,与方法本身有关。高效液相色谱法与放射性免疫法是完全不同的,结果会有差异,是否可替换要做验证。高效液相色谱法适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析。放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)。为一种将放射性同位素测量的高度灵敏性、精确性和抗原抗体反应的特异性相结合的体外测定超微量(10-9~10-15g)物质的技术。主要用于激素类检测,肿瘤类,如甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),糖蛋白抗原(CA19-9)等检测,放射受体分析等。目前双标记液相IRMA技术是五代RIA技术中最具推广意义的。双标记液相IRMA对于中小化合物的灵敏度较高,检测量程宽,特异性强,适宜大量样本检测。此方法分析结果存在一定的系统误差,以及检测时不可避免的环境因素影响,但此误差并不影响实际样品的检测及临床诊断。
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kong0908[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 majinfei8 于 2010-11-4 16:05 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
看了各位专家的解答,发现没有一个定论,是不是只要我的方法学可靠的话我就可以忽略这个误差的存在呢?

具体你可以看一下有没有相关的文献 参考一下
如果没有人这么做过,你可以进行比较,我觉得很有意义
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mingdongmmw[使用道具]
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有点意思。
应该是有差别的,最近朋友在做一个样品,杂质在不同的色谱条件在的含量不同,一种合格,一种不合格。另外一些样品对紫外的响应值不高
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出国吧[使用道具]
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回复 #51 majinfei8 的帖子

我觉得会有差别,但不至于一个90%,一个50%,不会差别特别大。我们有时会做物质的Potency,就是用至少两种以上的定量方法来定量,一般差别都在3%以内。
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majinfei8[使用道具]
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我个人觉得不应该有这麽大的差别,但具体原因还有待考察。
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hlee31155[使用道具]
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有可能的。如果都是用色谱或色质联用方法,不应该有很大差别。如果是同时用色谱法和放免法就有可能。因为色谱法测定的对象很可能与放免法不完全一致, 放免法的测定对象取决于抗体的专一性、特异性。
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chenjz[使用道具]
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正常情况有的相差百分之三至五,超出属不正常,需找出原因,这里不例举。
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