【求助】5‘RACE二扩弥散 - 经验共享

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标题:【求助】5‘RACE二扩弥散

04906[使用道具]
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发表于 2014-9-24 15:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢LS一直提的建议！

今天重新改过引物，把重叠序列加到500左右。这样估计目的带出来的话可能1000左右。希望可以降低错配等的几率，提高引物特异性。
另外体系也改了一下。之前一直按平常PCR做的体系（之前UPM一直加的0.2...20微升体系）
而巢式和热启动等我觉得已经针对特异性去走。
下面再跑跑，回头再发上来。

至于RNA，其实跑胶的情况和实际情况，我也说不准，尽量再完善一下吧。

whitesheep[使用道具]
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发表于 2014-9-24 15:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

正在5’RACE纠结中

whitesheep[使用道具]
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发表于 2014-9-24 15:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢LS一直提的建议！

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今天重新改过引物，把重叠序列加到500左右。这样估计目的带出来的话可能1000左右。 ...

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想问楼主现在做5‘RACE有什么高招没，现在提RNA一直提的有降解，不知道应该怎么办了，能给高招不，我提动物组织的RNA

xue258[使用道具]
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发表于 2014-9-24 15:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

自己做不出来就换个人帮你做，可能是操作细节上每个人不同，结果也可能不同

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