【求助】琼脂糖凝胶电泳分离DNA与聚丙烯酰胺凝胶...

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标题:【求助】琼脂糖凝胶电泳分离DNA与聚丙烯酰胺凝胶...

woshi[使用道具]
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发表于 2014-9-25 14:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

琼脂糖凝胶电泳分离DNA与聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质原理方法上有什么异同？
为什么琼脂水平跑，而PAGE要竖着跑呢？
为什么DNA多用琼脂？而蛋白就用PAGE？

baidukk[使用道具]
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发表于 2014-9-25 14:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

琼脂糖胶的孔径比较大，而PAGE胶孔径比较小，因此琼脂糖可以电泳3kb的DNA片段（分子量约为3k x 660 Da=1980kDa，哪有这么大的蛋白质啊，一对碱基平均相对分子量为660 Da），而PAGE却不能分离，一般电泳检测的蛋白质也就30kDa~ 250kDa。
对于引物那么长度的寡核苷酸片断，举例24bp来说，分子量约为15.8 kDa，就可以理解引物合成公司为什么经常用PAGE（Ultra）纯化而不用琼脂糖胶纯化了。

join[使用道具]
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发表于 2014-9-25 14:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

聚丙烯酰胺凝胶有两层胶，所以还得竖着跑。个人看法

xiaoxiaoniao[使用道具]
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发表于 2014-9-25 14:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

再补充一点，你看对不对？
PAGE胶有2层，浓缩胶层的目的，最主要的是浓缩样品。那浓缩样品靠什么发挥作用的？一个是缓冲液体系，一个可以是重力的作用啦。

chuntian1983[使用道具]
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发表于 2014-9-25 14:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 xiaoxiaoniao 于 2014-9-25 14:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
再补充一点，你看对不对？
PAGE胶有2层，浓缩胶层的目的，最主要的是浓缩样品。那浓缩样品靠什么发挥作用的？一个是缓冲液体系，一个可以是重力的作用啦。 ...

重力作用应该微乎其微吧浓缩胶其实就是保证前期跑的慢点最终目的还是跑胶的时候能在同一水平线

831226[使用道具]
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发表于 2014-9-25 14:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

PAGE跑的是短链，琼脂糖胶跑的链相对长些！