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标题:【讨论帖】PCR问题交流

junhun[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的PCR做了好几回都没有跑出来，怎么判断PCR中是引物有问题？
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白白的[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想请教一下聚合酶延伸效率的问题。一般的聚合酶的延伸效率是多少？在做pcr的时候，为什么20s就可以扩增出 ...

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看你用什么酶了 不同酶扩增速度不同 有一分1k的也有一分钟2k的啊 建议看看酶的说明书。
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白白的[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的PCR做了好几回都没有跑出来，怎么判断PCR中是引物有问题？

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让引物跑胶呗
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喵咪[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想请教一下聚合酶延伸效率的问题。一般的聚合酶的延伸效率是多少？在做pcr的时候，为什么20s就可以扩增出 ...

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其实是可以的，酶的活性是有一定的范围的，我记得我看过Taq酶有10s扩增1K的。像Phusion酶就是15——30s 1Kb的，说明给的都应该是比较保守的。
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发表于 2014-9-26 18:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知群里是否有做多重PCR的兄弟姐妹，在这里想请教一下下面的多重PCR程序是如何设计出来的，需要依据什么来设计？请高人指点。
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