小中大请楼主帮忙回答一下这个问题,谢谢了
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首先一点你要确定你的目的,如果你要获得该基因的全长,包括5’帽子3’尾巴的话你就要扩增全部的cds并做RACE获得末端序列。
如果你要做基因表达,那么你就要确定你表达哪一部分,如果是表达全长的话你就要设计引物扩增全部的CDS并在引物的5’端引入酶切位点,如果泥只需要扩增它的活性功能区,那么你就要找到CDS中的成熟肽序列并设计带酶切位点的引物扩增。
至于具体的设计方法,请参考论坛其他引物设计的帖子,具体问题具体分析。