【求助】在纯化过程中哪一步能大量除去内毒素？ - 经验共享

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标题:【求助】在纯化过程中哪一步能大量除去内毒素？

bojitu[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不知道你的蛋白是怎样的，一般低电导偏碱性pH下，用阴离子的流穿模式去除内毒素的效果非常好的。一般我们的样品经过这一步后，内毒素都及格。阳离子的结合模式也能较多的去除内毒素，但是比较关键的是你每步所用的器具都应该去内毒处理（包括称量试剂的）（干热或者碱处理）。你们内毒检测是怎样的？一般我们的检测缓冲液是检测不出来的，要是缓冲液都能检测出来，一般就是操作过程污染了，控好这些内毒基本就没问题了。

ns5fan[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 bojitu 于 2014-10-7 16:40 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不知道你的蛋白是怎样的，一般低电导偏碱性pH下，用阴离子的流穿模式去除内毒素的效果非常好的。一般我们的样品经过这一步后，内毒素都及格。阳离子的结合模式也能较多的去除内毒素，但是比较关键的是你每步所用的器具都应 ...

请问下在纯化过程中对水源有要求吗？是否非要用注射用水？我们一直用的是高纯水，内毒素<0.001EU/ml。

greenbee[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们用的也是超纯水，但是内毒检测是没有的（低于试剂最低检测限），所以有点好奇你们的内毒检测是怎样操作

yueban-1147[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你每一步操作都留样检测一下内毒素，然后就知道你哪一步去除内毒素最多了。我记得我们有个产品亲和层析这一步内毒素去除最多。

ns5fan[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:42 资料个人空间短消息加为好友

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原帖由 yueban-1147 于 2014-10-7 16:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

你每一步操作都留样检测一下内毒素，然后就知道你哪一步去除内毒素最多了。我记得我们有个产品亲和层析这一步内毒素去除最多。

我们是用湛江安度斯的鲎试剂（凝胶法）灵敏度0.25EU/ml半定量检测，也用过显色法（Thermo的）定量检测。你们的试剂检测限是多少？

yueban-1147[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:43 资料个人空间短消息加为好友

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原帖由 ns5fan 于 2014-10-7 16:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我们是用湛江安度斯的鲎试剂（凝胶法）灵敏度0.25EU/ml半定量检测，也用过显色法（Thermo的）定量检测。你们的试剂检测限是多少？

看来都是差不多的，我们也是安度斯，但是这个灵敏度0.25的怎么能检测到小于0.001的结果呢（
即便是定量法鲎试剂最低检测限也是0.005 EU/ml吧）

ns5fan[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:44 资料个人空间短消息加为好友

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0.001是超纯水的出水标准不是我们检测的，我们定量检测PBS内毒大约0.03EU/ml

chuntian1983[使用道具]
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发表于 2014-10-7 16:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

层析三部都能除去内毒素，考虑哈填料CIP、SIP是否有效

ha111[使用道具]
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