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标题:[未解决]岛津HPLC仪LC—10ATVP 欲测一蛋白质纯度

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dafu1234[使用道具]
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发表于 2010-11-9 21:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

岛津HPLC仪LC—10ATVP 欲测一蛋白质纯度

大家好！初次接触HPLC，望有经验者指教。
现有一岛津HPLC仪LC—10ATVP 欲测一蛋白质纯度，所用流动相为0。01M PBS，柱子为TSK4000WX凝胶过滤柱，请教与柱子相关的操作步骤及注意事项。比如检测结束后柱子的处理方法。

[ 本帖最后由 miracle 于 2010-11-10 10:42 编辑 ]
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naren4545[使用道具]
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发表于 2010-11-10 10:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
凝胶过滤柱用后要低温冷藏的！
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maomi530[使用道具]
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发表于 2010-11-10 13:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
和普通C18柱的用法差不多，平衡时间和清洁时间要相对长一些

欢迎坛友常来论坛交流学习。
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165275960[使用道具]
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发表于 2010-11-10 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 QQ

 小中大
洗柱子的方法有多种，看你的样品中有没有盐分了，有盐分的话要用水冲洗，C18柱子一般用90%水和10%的甲醇冲洗30分钟；后用90%甲醇，10%水洗半小时。还要看你用的是什么流动相了
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liuzhikunwq[使用道具]
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发表于 2010-11-10 16:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
仪器用过 没测试过蛋白质
大分子的东西是不是不好处理呀？
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chenxiaohu[使用道具]
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发表于 2010-11-11 10:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 dafu1234 的帖子

我们也用你这个型号的色谱仪，不过没用过你这柱子。
我用的是TSK gel ODS-100V(20mm*25cm) 做制备
最后处理是先用1个柱体积的甲醇洗淋 再用2个柱体积的氯仿洗淋 最后又用2个柱体积的甲醇洗淋 完事后用甲醇保存。

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