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标题:【求助】为什么细胞总也铺不匀？

chuntian1983[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

采用前后摇晃的方法和用吸管吹打都是很有用的经验。值得推广。
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用的摇动方法是8字摇动培养板，这样效果不错的，很均匀！
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tianmei001[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上建议不错,但有时细胞还会集中于孔的边缘,可能是由于吸管来回吹吸的原因吧.
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=pkchen=[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得和液体表面张力有关，孔越小越明显。另外，对培养器皿底部地处理也很重要.我觉得必要的摇晃还是应该的，关键看你摇晃地是不是对，只要不作产生涡流底旋转型动作就好。
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baidukk[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

吸管来回吹吸，只是在孔中间进行操作，应该不会使细胞集中到孔的边缘吧。
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ha111[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也曾为种六孔板不匀而大伤脑筋，重复做了好几次也没有很大的进展，很是郁闷，后来想了一些方法改进，现在做的要比以前好些了，有一些心得供大家参考： （1）像hblfj说的，种完后不要再显微镜下观察，这样可以增加晃动的机会，事实证明晃动可以使细胞集聚。 （2）种的细胞时候细胞不要太多，最好在种之前计数，培养液最好多加一点，不要觉得使浪费。 （3）细胞在孔中央吹打 支持GUMP的观点，hblfj是细胞培养的专家，我们有什么搞不定的都问他的
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞均匀度特别是对于转染来说是很重要的（很多人都为此苦恼），本人的做法你可以借鉴一下： 首先常规接种后，切忌摇晃！！这一点很重要，举个例子来说，装一杯污水，轻轻一晃，什么乱七八糟的东西都聚到中间了，可能是向心力在做怪吧。本来种的较均匀的细胞越发聚到中间了，这是个误区！ 如不是很均匀，对于6孔板，因为培养基较多，用吸管轻轻吸吹几次，中间吸出，边缘打进，反复几次后盖盖后不要晃动，小心置培养箱，待贴壁后再观察，切忌反复拿动。对于12或24孔板就简单一些，培养基较少，吸出打进反复几次就可以了。 这方面如有问题多联系！

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谢谢,难怪我每次细胞总之长不均匀,尤其是细胞瓶的边缘和后方
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jujuba[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是做MTT的，买了进口96板后smmc7721铺板时，细胞总是集中在中央。也就在前几天，突然突发奇想，我也没想上面说的那么正规，就随便的O型震荡，再上下震荡，最后再O型震动了一下，我看细胞分布都非常的均匀。
另外，希望跟我做的前辈能给我点建议
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nut6694[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不错，我的细胞在24孔培养板中也是边缘先张满，中间比较稀松，难道有边缘效应？
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qhyu[使用道具]
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发表于 2014-10-11 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我作MTT时没有出现分布不均。相反，24板却集中在中央，后来我先加500ul陪基，待细胞贴壁后在多加些，细胞分布就均匀了。我想，与板子的质量有关，可能是板子底部不平引起的。
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