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标题:【求助】pcr产物拖尾问题

小螺号[使用道具]
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发表于 2014-10-28 19:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】pcr产物拖尾问题

大家帮我看看图中的拖尾是怎么回事。我是用pcr产物回收过后再pcr的


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2014-10-28 19:56
M@(Y6S~~[85@9C$XRZN23]7.jpg (24.75 KB)
 
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seagate[使用道具]
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发表于 2014-10-28 19:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
尝试降低退火温度。
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发表于 2014-10-28 19:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
别人都说，是要升高温度啊！。。。
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nikonun[使用道具]
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发表于 2014-10-28 19:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
恩  是升高的
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发表于 2014-10-28 20:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 nikonun 于 2014-10-28 19:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
恩  是升高的

我之前试了升高的，但是不行啊!可不可以用这个做克隆呢？
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发表于 2014-10-28 20:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想说PCR后再PCR，为什么这么做
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发表于 2014-10-28 20:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 bring 于 2014-10-28 20:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我想说PCR后再PCR，为什么这么做

因为第一次pcr拖尾很严重啊
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zbboom[使用道具]
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发表于 2014-10-28 21:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
尝试一下模版不要加太多，做个克隆应该是有作用的
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小螺号[使用道具]
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发表于 2014-10-28 22:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 zbboom 于 2014-10-28 21:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
尝试一下模版不要加太多，做个克隆应该是有作用的

感谢回复！有作用是指什么？你之前做过相似的工作吗？
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vcve[使用道具]
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发表于 2014-10-28 22:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
调退火温度没用的话就换酶试试看，Phanta Super的DNA Polymerase效果不错，现在我用它代替以前用的PrimeSTAR
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