PCR仪 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】有懂的朋友帮我看看这张图是什么问题？

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 12  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】有懂的朋友帮我看看这张图是什么问题？

dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态 离线
1

发表于 2014-10-29 10:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】有懂的朋友帮我看看这张图是什么问题？

本人是分子实验菜鸟一枚，最近在做issr分子标记，现在进行到了筛选引物的阶段，但是问题重重难以在进行下一步了，大家给帮忙看看问题吧,我用的是mix.
图1


查看积分策略说明
附件
2014-10-29 10:39
eric 2013-05-17 14hr 08min.jpg (15.76 KB)
 
顶部
dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态 离线
2

发表于 2014-10-29 10:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这是我用9个不同的模板在第二次筛选引物，用的是用一条引物，我用的MARKER是100bp的，胶是2.5的，电泳时的电压是85v为什么我觉得跑的这个图分不开呢，跑了将近2个半小时呢？条带与条带之间就是挤在了一坨，是不是还可以分的开一些，我电泳了将近两个半小时呢，是什么原因呢？还有就是为什么有的带亮有的带弱？其中一条带还没有，是不是在往pcr管里加的时候就没加上？pcr是一锅p的，究竟是什么原因呢？
图2、


查看积分策略说明
附件
2014-10-29 10:40
eric 2013-05-18 22hr 37min.jpg (26.58 KB)
 
顶部
dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态 离线
3

发表于 2014-10-29 10:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个为什么条带左低右高呢？是不是电泳槽的问题呢？如果是电泳槽就是硬伤了。。。9个不同的模板其中又是有两个模板没东西和第一幅图一样。有的条带是楔形的不是矩形，为什么呀？
我是新手，才做这个半个多月，很多东西不懂，希望大家指教，也可以给别的同样遇到此类问题的童鞋以前车之鉴。。。希望大家多提宝贵意见。。。在此先谢谢大家了。。。


查看积分策略说明
附件
2014-10-29 10:42
eric 2013-05-18 22hr 37min.jpg (26.58 KB)
 
顶部
wood533[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76132
精华 0
积分 863
帖子 1385
信誉分 100
可用分 7745
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
4

发表于 2014-10-29 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
说说你的实验目的先。我看你的图跑得可以了，完全可以分析就行了，不要太纠结一些没有意义的东西
顶部
yueban-1147[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
5

发表于 2014-10-29 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

同样我也是做SSR  为何我就 绝大部分只有一个条带。。而你的条带这么多呢。搞得和酶切一样，你做的是什么物种？？？
顶部
yueban-1147[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
6

发表于 2014-10-29 10:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不好意思看错了 你是做ISSR  我还以为是 SSR
顶部
yueban-1147[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
7

发表于 2014-10-29 10:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我又个问题 SSR 可以很准确的知道在哪个染色体上。只要找到和SSR连锁的 表型 就可以确定控制该表型的基因在哪个染色体上。 但是ISSR 的引物 能知道在哪个染色体上嘛？？我看了ISSR的原理 怎么觉得不能用来定位啊
顶部
redbutterfly[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76433
精华 0
积分 701
帖子 1102
信誉分 100
可用分 6281
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
8

发表于 2014-10-29 10:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

能不能倒过来放呢？
顶部
dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态 离线
9

发表于 2014-10-29 10:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 wood533 于 2014-10-29 10:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
说说你的实验目的先。我看你的图跑得可以了，完全可以分析就行了，不要太纠结一些没有意义的东西

哦，好吧，我就是有一个玉兰种，虽然是一个种，但是不同的地方确有不同的花色，我想就是通过标记的方法看一下他们之间的遗传距离，遗传多样性之类的，有没有朋友做过这个呀？我在想是不是还要做液相分析什么的呀？
顶部
dongdongqiang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 79825
精华 1
积分 473
帖子 601
信誉分 102
可用分 3821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-12-16
状态 离线
10

发表于 2014-10-29 10:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 redbutterfly 于 2014-10-29 10:44 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

能不能倒过来放呢？

呵呵，我以前咨询过这个问题，有的朋友说这是不成文的规定要倒过来放着看，但是我咋觉得正着放看顺呢？哈哈哈。。。
顶部
 12  1/2 12››