生物制药 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】HPLC色谱图中出现两个负峰是怎么回事?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:【求助】HPLC色谱图中出现两个负峰是怎么回事?

wood533[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76132
精华 0
积分 863
帖子 1385
信誉分 100
可用分 7745
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-1
状态 离线
11
 
如果第一个峰确定是溶剂峰,那你的待测峰出峰时间太快了,几乎紧跟着溶剂峰就出来了,最好把流动相比例调一调,使样品峰与溶剂峰之间有一段时间差,否则溶剂峰可能会对待测峰的测定有影响。也许你多进几针,后面的倒峰就没有了,因为你的标品有第二个倒峰,而供试品却没有,有可能是柱子没有平衡好。关于色谱峰面积与浓度的关系问题,应该是浓度增加,峰面积增加。只是如果不是在线性范围内,浓度的增加,而峰面积增加不一定成比例。如果你是照标准做,应该是两者成正比;如果是你自己做标准,那你就要做个线性,看看你现在的浓度是不是与峰面积成正比。
顶部
bgf5[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76186
精华 1
积分 430
帖子 435
信誉分 102
可用分 3111
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
12
 
你把样品冻干一下,用流动相溶解,应该就好了
顶部
lixi559[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73492
精华 0
积分 560
帖子 820
信誉分 100
可用分 4896
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-23
状态 离线
13
 
流动相组成跟你的溶剂最好保持一致,如果有差异的话,容易有倒峰出现,但有时候,机器就是会出现一段时间的鬼峰,无法解释
顶部
xue258[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75643
精华 0
积分 746
帖子 1171
信誉分 100
可用分 6696
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
14
 
你应该让你的主峰尽量往后靠一点,这样子才好分析,毕竟溶剂峰跟主峰太靠近了
顶部
9妖9[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 118114
精华 0
积分 226
帖子 172
信誉分 100
可用分 1646
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-12-10
状态 离线
15
 
应该是你设定了参比了,把参比去掉就可以了。
顶部
mamamiya[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72974
精华 0
积分 653
帖子 986
信誉分 100
可用分 5763
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
16
 
我以前做液相也遇到这样的情况,但只是一个倒峰,我觉有两种可能,一是进样时气泡没有排干净,二是跟你的柱子有关系,把柱子超声一下
顶部