【分享帖】细胞培养常见问题及回答 - 经验共享

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标题:【分享帖】细胞培养常见问题及回答

我是一片云[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

11.Qualified和 Certified 胎牛血清有什么差别?

Certified 胎牛血清包括了Qualified 胎牛血清执行的所有的标准检验程序，而且除了这些标准检测，Certified胎牛血清还有如下一些附加的检测： End-Point Determination of Endotoxin Content 噬菌体检验生物化学检测激素的检测血红蛋白检测 Sf9 细胞生长促进及方法学检测

daod[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

英杰公司的吧？

我是一片云[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 daod 于 2014-11-1 15:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

英杰公司的吧？

好象确实很多中文的培养资料确实是从Invitrogen那里翻译来的，不过Hyclone和Invitrogen的资料也都差不多。

dodoit[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

怎么没有C2C12？

lixi559[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我觉得上面用酶消传代的时间太长了吧?另外我周围的人好象在传代时没有再把细胞离心,而是酶消后,去酶,静置一会儿,加培养基中止,再直接分装

summerxx[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

还想请问A10系的细胞是什么细胞

我是一片云[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如何克服细胞培养液中L-谷氨酰胺易降解的缺点
二肽谷氨酰胺（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）
—细胞培养中稳定而不降解, 可高压灭菌, 释放最少毒性氨—

在细胞培养液中L-谷氨酰胺是大部分细胞培养基的基本成分；而L-谷氨酰胺是一种并不稳定的氨基酸，在中性的水溶液中会自发降解；需要频繁地补加L-谷氨酰胺。因而在培养操作过程中经常：（1）频繁打开盖子，增加了破坏无菌状态的可能性；（2）过多的追加L-谷氨酰胺，增加了培养基中氨的毒性水平。试验结果证实：在DMEM培养液分别加入二肽谷氨酰胺和L-谷氨酰胺，这两组培液在37℃环境中，每天取出样品在HPLC上检验二肽谷氨酰胺和L-谷氨酰胺的含量水平。其结果显示：二肽谷氨酰胺基本不水解，释放最少毒性氨；而L-谷氨酰胺则每天会水解释放出较多的氨，提高了培液中氨的毒性水平。
将L-谷氨酰胺和二肽谷氨酰胺配成溶液在121℃、20分钟高压灭菌的环境中，其结果：L-谷氨酰胺在高压灭菌后被大幅降解而产生大量毒性氨，二肽谷氨酰胺在高压灭菌后基本无影响。
二肽谷氨酰胺在细胞内被氨肽酶（E.C.3.4.11.2）所水解，产生L-谷氨酰胺和L-丙氨酸；因此在大部分细胞系统中二肽谷氨酰胺就可以象L-谷氨酰胺同样有效地被利用。二肽谷氨酰胺是最优替代物，它无需适应；既可用于贴壁细胞培养，也适合于悬浮细胞的培养。其优点如下：（1）需要长期的孵育而不补充营养的系统。（2）要求最优标准化培养基进行长期的研究。（3）对氨敏感的培养系统。（4）代谢研究。（5）高压灭菌的培养基。二肽谷氨酰胺可以200mM的溶液直接加入到培养系统中来替代L-谷氨酰胺，使细胞培养的结果更可靠。
上海恒利安生物科技有限公司已成功开发出用于细胞培养的二肽谷氨酰胺商业化产品。
公司除了生产除了各种传统粉末型细胞培养基外，还生产了限定化学成分培养基（chemical defined medium,CDM）---该培养基为非动物性源物质水解而成的培养基粉末，其特点为：无任何过敏源和组成成分恒定的优点。另外还可生产无血清培养基（serum free medium,SFM）和无蛋白培养基（protein free midium,PFM）以及液体细胞培养基。在国内率先生产推出了二肽谷氨酰胺(L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)细胞培养试剂，克服了L-谷氨酰胺在细胞培养中不稳定易降解, 不能高压灭菌, 释放较多毒性氨等缺点。
本公司生产的细胞培养基有：
一、MEM细胞培养基系列(粉末)
●MEM（A）【不含谷氨酰胺、可高压灭菌】
●MEM（G）【含谷氨酰胺、多种非必需氨基酸、除菌过滤灭菌】
●MEM（H）【含谷氨酰胺、高糖型、除菌过滤灭菌】
●MEM（L）【含谷氨酰胺、低糖型、除菌过滤灭菌】
●MEM（α）【含谷氨酰胺、除菌过滤灭菌】
●MEM（D）【含谷氨酰胺二肽、可高压灭菌、大幅度减少血清的用量】
二、DMEM细胞培养基系列(粉末)
●DMEM（A）【不含谷氨酰胺、可高压灭菌】
●DMEM（H）【含谷氨酰胺、高糖型、除菌过滤灭菌】
●DMEM（L）【含谷氨酰胺、低糖型、除菌过滤灭菌】
三、RPMI-1640细胞培养基系列(粉末)
●RPMI—1640（A）【不含谷氨酰胺、可高压灭菌】
●RPMI—1640（A）无酚红【不含谷氨酰胺、高压灭菌】
●RPMI—1640【含谷氨酰胺、除菌过滤灭菌】
四、199细胞培养基系列(粉末)
●199含酚红培养基
●199无酚红培养基
●199无血清培养基
五、水解乳蛋白细胞培养基(粉末)
●属于限定化学成分培养基, ●不含有动物蛋白质及其水解产物
六、欧氏平衡盐（细胞培养用）（粉末）
●欧氏平衡盐细胞培养基
●欧氏平衡盐(无酚红)细胞培养基
七、F-10,F-12细胞培养基系列(粉末)
●F-10细胞培养基
●F-12细胞培养基
八、二肽谷氨酰胺（L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）
●在细胞培养中稳定而不降解, ●可高压灭菌, ●释放毒性氨最少
九、其它类型细胞培养基（粉末）:根据客户要求定制
十、液体培养基系列:型号根据客户要求定制
●100ml/瓶, ●200ml/瓶, ●400ml/瓶

mercedes[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问关于楼主可以发些关于vero细胞培养的注意的操作么？

=pkchen=[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

怎么没有vero细胞和MDCK细胞的呢?

niangao1980[使用道具]
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发表于 2014-11-1 15:45 资料个人空间短消息加为好友

小中大

哪位高手可以告诉我G418的具体配方？

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