生化反应和生化分离

8月15日，The  Journal  of  Biological  Chemistry发表了上海生科院生化与细胞所王恩多研究组的最新研究成果：通过敲除亮氨酰-tRNA合成酶基因的酵母菌株揭示对酵母细胞质亮氨酰-tRNA合成酶（LeuRS）最佳编校活力关键而独特的氨基酸残基。

LeuRS含有编校结构域，通过编校功能从非对应氨基酸中区亮氨酸以保证蛋白质生物合成的忠实性。为了更清楚地了解真核生物LeuRS编校机制，王恩多研究组的博士研究生姚鹏等研究人员成功构建了酵母细胞质LeuRS(ycLeuRS)基因(leuS)敲除的酵母菌株(ScleuS)，用以在酵母（Saccharomyces  cerevisiae）和人细胞质中分析LeuRS催化tRNA氨基化的性质。对编校功能有缺陷的ycLeuRS变种的体外测定的数据与用ScleuS内得到的体内数据相符。研究结果表明ycLeuRS的转移后编校途经在保证氨基酰化的忠实性方面起着关键作用；在非对应氨基酸存在的条件下，带有编校功能缺陷的LeuRS变种的细胞存活率大大下降。该项研究指出某些围绕编校活性中心的半保守氨基酸残基在调节编校效率方面是非常重要的。这一体内研究系统可用于检查潜在的靶向真菌LeuRS的氨基酰化活性中心和编校活性中心的化合物（新药）是否有效。