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标题:【求助】荧光定量PCR溶解曲线Tm跨度宽是怎么回事

misswu61[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】荧光定量PCR溶解曲线Tm跨度宽是怎么回事

荧光定量PCR溶解曲线Tm跨度宽是怎么回事，谢谢大家
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feima+[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

染料法？
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misswu61[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 feima+ 于 2014-11-29 14:30 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

染料法？

恩是的，我见他们做的好的都是比较窄，Tm跨度很窄……我的这是第二次预实验了，还是这样。罗氏的试剂盒，采用的两步法。
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leifengta[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

第一次看就这么宽的。
峰的数量代表特异性，峰宽窄代表均一性。
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misswu61[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 leifengta 于 2014-11-29 14:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

第一次看就这么宽的。
峰的数量代表特异性，峰宽窄代表均一性。

均一性？是怎么个情况？
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leifengta[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #5 misswu61 的帖子

你怎么设置的溶解曲线程序？
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leifengta[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #5 misswu61 的帖子

你的TM值是多少？？？
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misswu61[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 leifengta 于 2014-11-29 14:32 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你怎么设置的溶解曲线程序？

Hold @ 95°c, 10 min 0 secs       
Cycling (40 repeats)        Step 1 @ 95°c, hold 15 secs
Step 2 @ 60°c, hold 60 secs, acquiring to Cycling A(FAM/Sybr)
Melt (60-95°c) , hold 45 secs on the 1st step, hold 5 secs on next steps, Melt A(FAM/Sybr)
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TNT[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我来了 跟你说用热点的更好
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fangxiang[使用道具]
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发表于 2014-11-29 14:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这里面应该有两个不同的产物了吧？都出现了两个TM值！
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