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标题:【求助】质粒酶切后求解

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发表于 2014-11-29 14:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】质粒酶切后求解

从左到右分别是：质粒用Agel酶切，质粒用Agel酶切，marker,原始质粒。酶切体系50ul,质粒用6ug,37度水浴孵育2.5h,  为什么出现这种弥漫的条带？


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发表于 2014-11-29 14:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这是双酶切Agel+Ecorl 同时酶切的结果，50ul体系，2ug的质粒，37度水浴4h.这次酶切结果就相对好点。为什么我单酶切条带那样？是不是我酶切时间不够长？请各位大侠指点迷津。谢谢


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发表于 2014-11-29 14:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这是双酶切Agel+Ecorl 同时酶切的结果，50ul体系，2ug的质粒，37度水浴4h.这次酶切结果就相对好点。为什么我单酶切条带那样？是不是我酶切时间不够长？请各位大侠指点迷津。谢谢


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发表于 2014-11-29 14:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
酶切量太大了，电泳跑出来就是不好看
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发表于 2014-11-29 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

只是因为量大吗？那这种切出来还能进一步再切吗？谢谢
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 小中大


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原帖由 feima+ 于 2014-11-29 14:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
酶切量太大了，电泳跑出来就是不好看

这种感觉不是量大的问题了吧，感觉跑出来是拖拖拉拉的，而且很是弥散，是不是降解了呢？可是我只切了2.5h,还是切的时间不够长？
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发表于 2014-11-29 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 @STAR@ 于 2014-11-29 14:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这种感觉不是量大的问题了吧，感觉跑出来是拖拖拉拉的，而且很是弥散，是不是降解了呢？可是我只切了2.5h,还是切的时间不够长？

一般不会降解，不过Ecor 1的话，如果是快切，有可能会切碎
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发表于 2014-11-29 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

和量绝对有关系
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发表于 2014-11-29 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


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原帖由 wiwi 于 2014-11-29 14:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

和量绝对有关系

这样啊，难怪我双切用量少就好点，那切成这样还能继续胶回收再切吗
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 小中大


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原帖由 feima+ 于 2014-11-29 14:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

一般不会降解，不过Ecor 1的话，如果是快切，有可能会切碎

我用的不是Ecor 1 啊。是Age1。也会这样吗？如果切碎了还能继续回收再切吗
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