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标题:【讨论帖】PCR后琼脂糖电泳成像

S6044[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】PCR后琼脂糖电泳成像

这是我pcr以后，琼脂糖电泳的效果照片。由于是刚接触这东西，有很多不解的地方，这照片能反映出什么问题，请大家给予指点！


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2014-12-1 14:49
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S6044[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1、两张图片只是模式不一样，一张是UV模式，另一张是white模式，按理说应该是UV模式，但是white模式下看到的效果感觉似乎好一些。请问这两种模式应该用哪一种呢？

2、从我的电泳图上能看出哪些问题？望高手不吝赐教！谢谢


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huifeng0516[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
阴性对照污染了，正常应该什么也跑不出来，应该有阳性对照吧，正常吗？marker太浅了，不知是点少了还是跑得时间太久了。
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xue258[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

white是什么模式？看着阴性对照有点问题，别的都挺好的
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发表于 2014-12-1 14:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

估计你开WHITE的时候UV也开着吧？WHITE是调胶位置的，单独开应该是看不到条带的。
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不知道楼主用什么染的？EB？怎么还弯弯曲曲的呢？是不是电压过大了？三楼说的有道理，阴性对照有带，不管深浅，在我们实验室是不行的……需要重新换水换引物p，在一个maker不清晰，可能胶有点问题
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misswu61[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

marker 跑的不好。你的样品是一种DNA？右边这些怎么参差不齐~
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seagate[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是电压不稳定导致跑的带弯弯曲曲的，阴性对照有带说明污染了
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发表于 2014-12-1 14:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你说的阴性对照，是指不应该扩出条带？还是条带大小与阳性不同？如果是前者，这个图说明你的PCR污染了，如果是后者你可根据条带大小判断是否与预期一致。电泳效果不好，刚接触也难免，可以向师兄师姐请教，自己可以慢慢积累经验。
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glass[使用道具]
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发表于 2014-12-1 14:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
white模式是白光模式，UV紫外光模式。

    开着UV的同时，打开white，有外部的投射光，CCD拍取到的图片对比度会相对高些。
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