小中大【求助】RACE-PCR扩增3端和5端问题
本人最近要用RACE-pcr扩增3端和5端。看来很多资料还是很糟。这个PCR有专门的试剂盒，我准备买宝生物的，但是引物设计还是很犹豫，不知道该咋整。
1.我只需要扩出3端（约150BP）和5端（约300BP）,引物必须设计在3端和5端的范围内吗？有人说RACE其实很简单，就需要设计两对引物，那这两对引物的相对位置有什么要求，也就是说以全基因做为模板，下游引物的位置都要在上游的后边吗？
2.看很多文献都是设计了两对引物，不是很理解，有人能告知一下这两队引物各是干什么用的吗？
