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标题:【求助】多糖沉淀后，用95%乙醇和无水乙醇洗涤的...

loli[使用道具]
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发表于 2014-12-3 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
水提醇沉法，要除去小分子化合物
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9900[使用道具]
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发表于 2014-12-3 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
初步醇沉的过程中有包裹小分子杂质，所以就用高浓度的醇或丙酮进行洗涤，脱水。
现在大生产因为醇沉成本太高很少用此方法进行多糖的分离和纯化，比较好的办法有膜超滤，以后很有优势的方法

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都已经是沉淀包裹里面的小分子了
那再用乙醇和丙酮洗的话 只能洗到初步沉淀的表面啊？？还是不能洗到内部？？怎么办
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daod[使用道具]
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发表于 2014-12-3 17:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
多糖在提取完后，最好用 冷 乙醇加至终浓度为70%~80%过夜离心收集沉淀，目的是去除粗糖中的部分杂质成分，使之成为粗精糖。之后就直接用无水乙醇两次及丙酮洗涤三次，目的都是去除糖中的水分，这一步才到真正的粗糖了。这一步在车间里做要特别注意湿度的大小，丙酮含量等结果有影响，GMP时可能国家要求的一项。95%乙醇洗涤这一步没必要用的。
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发表于 2014-12-3 17:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上说的都很好，确实是为了梯度脱水的目的，同时还能达到脱除色素，小分子杂质等目的。
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mingming0638[使用道具]
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发表于 2014-12-3 17:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
作用是除去水分
你有没有发现 刚沉出来的东西都是粘糊糊的 等用95 无水 丙酮（丙酮完了还有用乙醚洗涤的）洗完了 好一点的能成粉末状 至少不是黏黏的了

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请问用无水乙醇，丙酮，乙醚洗涤的比例是多少啊？知道吗，谢谢了，我也看了好多都没说具体的量。
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koook5695[使用道具]
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发表于 2014-12-3 17:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
乙醇沉淀后，用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤的目的主要有二：其一，进一步除掉其他杂质，如色素、蛋白、低聚糖、氨基酸等，达到纯化的目的。其二，洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用 ...

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具体的要怎么洗涤啊？用什么试验装置啊？
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kswl870[使用道具]
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发表于 2014-12-3 17:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 koook5695 于 2014-12-3 17:52 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
乙醇沉淀后，用无水乙醇、丙酮、乙醚进行洗涤的目的主要有二：其一，进一步除掉其他杂质，如色素、蛋白、低聚糖、氨基酸等，达到纯化的目的。其二，洗涤的过程也是脱水干燥的过程，所得多糖多呈粉末状，利于后续使用 ...

========== ...

最简单的可以用离心管振荡，离心收集沉淀，反复操作。如果样品量大的话可以在烧杯中搅拌，再离心收集沉淀，样品很多的话可以用漏斗过滤液可以。
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