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标题:【求助】养细胞经常无缘无辜的染菌?

yes4[使用道具]
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看了这么多的回复,其实也没这么麻烦的,我想主要注意以下几点就可以了: 1、塞在吸管端的棉段在1cm以上,稍紧一点,如不熟练,最好再包一层牛皮纸或锡铂纸,干烤消毒比较好,140度二个小时以上; 2、注意台内布置,保持整洁; 3、每次操作前75%酒精擦拭双手(有的人不擦照样不污染); 4、更重要的一点是:操作时双手或任何可疑的东西尽量不要在暴露的瓶口上方移动!!应绕道而行。一般污染多是不注意台内的层次感,其实这一点是很重要的; 5、找根本原因:向不污染的人要一些培养基或消化液什么的作作对照。 这方面有问题多与我联系!
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bgf5[使用道具]
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注意培养瓶的瓶口,还有你的培养基、胰酶配好后都要划块血平板,到第二天,看看有无菌生长,如无菌,方可用,还有培养基、胰酶等过滤灭菌后最好用小瓶分装(100ml~250ml) 防止一但污染,损失和浪费就大了,还有操作用的器具都要高压灭菌。
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uuooii[使用道具]
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虽然我不长期从事细胞培养,但我曾经养过一次细胞,是成功的,楼上的高手都已经说了很多了,我想告诉你在取材时也应该严格按照无菌操作,在无菌工作台操作时请穿上一次性手术衣。祝你成功。
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PCR[使用道具]
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最好是涂片看看是什么菌?注意操作,吸管碰别处立即更换。污染是常有的事,也不必太给自己压力,熟能生巧。

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不能这样说哦,污染是可以尽量避免的 虽然不是绝对 我们实验室就快有一年没有被污染过了
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vvmmoy[使用道具]
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也有可能是细胞培养液出现了问题,最近我找到一个公司有即开即用型的培养液,我用了感觉还可以,价格也适中,要不你去试试。(这个公司网站:cuturl('www.genom.com.cn'))
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whitesheep[使用道具]
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污染源很难找,但是只要你遵循严格的无菌操作,说实话,想污染还不容易。 我的经验是这样的。 因为使用的是II级生物安全柜,所以也没有布置无菌室,我们就穿平时的工作服,但是要保持实验室的清洁是很重要的。操作前用新洁而灭认真擦一遍工作台,把要用的东西放上去,开紫外15min,关紫外后,吹风20min,这样子对操作者的身体危害可以减少。 吸管装在布套中,布套可分为几格,卷起后包上牛皮纸,15P 30min,尽量做到每次使用前都灭菌,我都是每次灭几套。橡皮塞装在饭盒中,灭菌和吸管一样。枪头盒子包上牛皮纸,8P 30min。这些灭菌后都应放在37度的烘房中烘干,有水的话就容易染菌。 枪在使用前用酒精棉擦拭枪头部分,酒精棉挤的干一点,买个枪架子,会方便的多。千万不要把枪的枪头部分朝上,容易污染。 取出吸管时,手不要碰到旁边的吸管,也不要碰到包吸管的布的里侧,烧一下吸管的尾部,插上吸球,吸培养基到细胞瓶时,如果碰到细胞瓶的瓶口,(碰到其他东西也要换)一定要换吸管。 打开培养基时,烧一下瓶口,不然污染了就心痛了。手不要经过开口的容器上方。 实验做完了就要及时清理桌面,用新洁而灭擦一遍。 目前想到的就这些了。
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831226[使用道具]
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我培养的细胞曾经有多皿出现过真菌污染,后来听取他人意见,我把培养箱彻底用酒精消毒,然后在培养箱的底下的水槽中放上500毫升高压过饱和硫酸铜溶液以后在也没有出现过此中情况。无菌操作也很重要,只要严格的执行操作原则,我觉得问题不大。抗生素尽管可能只起安慰作用,但还是加一点好。
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zhy平平[使用道具]
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你还应该注意所用培养液的无菌。。。
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wawa[使用道具]
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请问培养箱应如何消毒,多久清洁一次?
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koook5695[使用道具]
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20
 

可以用新洁而灭水溶液擦洗,我不算勤快,但是一个月擦一次总是要的。
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