细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】感受态与质粒转化

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 39  2/4 ‹‹1234››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】感受态与质粒转化

yonger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74174
精华 0
积分 572
帖子 803
信誉分 100
可用分 4861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
11

发表于 2014-12-6 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那就是感受态有问题，感受态为什么要放4°冰箱，不放-80°呢？

=====================================================

那是因为做好了感受态接着就做质粒转化啊，放-80℃那不是又要活化吗？
顶部
yonger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74174
精华 0
积分 572
帖子 803
信誉分 100
可用分 4861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
12

发表于 2014-12-6 10:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
检查一下氨苄的浓度，是不是太高，我的是50-100微克每毫升LB。

========================

我用的也是50微克每毫升LB
顶部
glass[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76223
精华 0
积分 715
帖子 1109
信誉分 100
可用分 6373
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
13

发表于 2014-12-6 10:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
板没问题吧？
顶部
wu11998866[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73743
精华 0
积分 569
帖子 797
信誉分 100
可用分 4850
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-27
状态 离线
14

发表于 2014-12-6 10:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
估计是感受态问题，我们都是做完感受态液氮速冻后放在-80，全程在4度或者冰上无菌操作。再说里面加甘油了，不到5分钟就化了，楼主为啥要放在4度？
顶部
66+77[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75637
精华 1
积分 596
帖子 785
信誉分 103
可用分 4751
专家分 20
阅读权限 255
注册 2011-10-26
状态 离线
15

发表于 2014-12-6 10:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

做感受态细胞的时候细菌活力很重要啊，一定要在对数期。
顶部
987789[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75248
精华 0
积分 479
帖子 598
信誉分 100
可用分 3870
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
16

发表于 2014-12-6 10:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
制备完感受态要放入-80℃保存啊，转化时取出来置于冰上自己融，然后就加质粒开始转化了啊，怎么还要活化？
顶部
rxcc33[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79965
精华 0
积分 633
帖子 885
信誉分 100
可用分 5303
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
17

发表于 2014-12-6 10:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不然去公司订几只感受态做一下，有保证，我们原来自己做，现在都是从公司订。正好也鉴别下是不是你的感受态的问题。
顶部
gogo[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77052
精华 0
积分 821
帖子 1341
信誉分 100
可用分 7487
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
18

发表于 2014-12-6 10:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感受态现做现用吧
顶部
yonger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74174
精华 0
积分 572
帖子 803
信誉分 100
可用分 4861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
19

发表于 2014-12-6 10:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
估计是感受态问题，我们都是做完感受态液氮速冻后放在-80，全程在4度或者冰上无菌操作。再说里面加甘油了， ...

===========================================================================================================

我是做了感受态以后，接着就要做质粒转化，所以就没有放到-80℃保存，因为不是批量做感受态，而是放在4℃条件下12h，第二天做质粒转化，这样不行吗?一定要放-80℃吗？
顶部
yonger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74174
精华 0
积分 572
帖子 803
信誉分 100
可用分 4861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-7
状态 离线
20

发表于 2014-12-6 10:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
做感受态细胞的时候细菌活力很重要啊，一定要在对数期。

========================================

摇菌一般也是过夜12h，应该菌的活力是可以保证吧？
顶部
 39  2/4 ‹‹1234››