【求助】感受态与质粒转化 - 经验共享

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标题:【求助】感受态与质粒转化

yonger[使用道具]
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发表于 2014-12-6 10:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

制备完感受态要放入-80℃保存啊，转化时取出来置于冰上自己融，然后就加质粒开始转化了啊，怎么还要活化？

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制备好的感受态一定要放-80℃保存吗，即使不是批量做，第二天就要做质粒转化？-80℃的感受态取出来化冻就可以直接做质粒转化？转化率会下降吗？

969[使用道具]
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发表于 2014-12-6 10:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

所有的过程就是注重细节，完善步骤。。。或许在无菌状态下可以再做一下。

youreyes[使用道具]
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发表于 2014-12-6 10:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

怎么能放4° ？？？要放-80°啊！

qiangren789[使用道具]
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发表于 2014-12-6 10:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我是做了感受态以后，接着就要做质粒转化，所以就没有放到-80℃保存，因为不是批量做感受态，而是放在4℃ ...

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那你放在-20都比4度强啊，感受态都是放在冰山融化，冰的温度多少，比4度低吧。这东西很矫情，尽量严格来做吧

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发表于 2014-12-6 10:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

根本就不是放置温度的问题，做好后24小时之内就用的话是可以放4度的，应该是感受态没做好，取1ml过夜培养的菌加入到100mlLB里边后摇2-3h就够了，如果是直接挑单菌落摇菌大概5h也行了，最好用大瓶摇保证里面的氧气充足

yonger[使用道具]
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发表于 2014-12-6 10:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能真的是感受态没做好吧，不过前前后后做过很多次了，都没成功

pulala[使用道具]
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