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标题:【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化？

PCR[使用道具]
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发表于 2015-1-7 10:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化？


我想用乙醇沉淀法纯化pcr产物，求助份具体步骤？谢谢
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fangxiang[使用道具]
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发表于 2015-1-7 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1.PCR产物中1：1加酚仿（苯酚：氯仿=1：1）抽提，12000g离心10分钟后取上清，后加入2倍无水乙醇沉降，20分钟后12000g离心10分钟，去掉溶液，将得到的白色沉淀干燥，加ddH2O回溶即可，但若是PCR产物较少，不建议此种方法。
最好能买个纯化试剂盒，也没多少钱
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birdfish[使用道具]
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发表于 2015-1-7 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不喜欢用苯酚和氯仿，用的另一种方案：
加1/10的3N醋酸钠，再加3倍量无水乙醇，冰浴30min，13600rpm离心20min，弃上清.加75%乙醇，再离心20min，弃上清，真空干燥，加水溶解。
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BUK[使用道具]
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发表于 2015-1-7 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
离心时间越长回收率越高，尤其是小片段。
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ending[使用道具]
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发表于 2015-1-7 10:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这种方法好用吗，与跑胶再胶回收的方法相比有什么优点
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