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标题:【求助】PCR-RFLP酶切问题

龟仙人[使用道具]
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发表于 2015-1-7 11:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PCR-RFLP酶切问题


请教高手关于pcr-RFLP的酶切问题，是直接拿PCR产物进行酶切还是需要将PCR产物回收后再做酶切？实验遭遇困难，请高手指教！
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mingming0638[使用道具]
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 小中大

我是直接拿pcr产物进行酶切的
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龟仙人[使用道具]
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发表于 2015-1-7 11:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 mingming0638 于 2015-1-7 11:09 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我是直接拿pcr产物进行酶切的

切出来的效果如何呢？我以前做预实验的时候基本都能切出的，现在大量做了几乎都切不出来，困惑中~
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mingming0638[使用道具]
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 小中大
我也是刚刚从师兄姐接过这个实验，他们一向都是直接酶切的，
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birdfish[使用道具]
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 小中大
我是有些SNP是直接酶切的，可是有些发现直接酶切之后条带不是很理想，影响SNP的判断。。。。不知道你现在怎么样了？
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龟仙人[使用道具]
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发表于 2015-1-7 11:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
倒是全都切出来了 图还可以 就是结果不会分析呀~POPGENE或是MEGA软件 数据输入你会吗？
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龟仙人[使用道具]
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发表于 2015-1-7 11:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教您，PCR-RFLP后期结果分析是怎么一个流程啊？我困在这儿了……
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2015-1-7 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是做这种实验的 有高手可以指点下吗 我更困惑
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daod[使用道具]
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发表于 2015-1-7 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家好，我在做RFLP方面的实验，向各位大侠请教个问题，就是我提的是活性污泥当中的细菌，基因组DNA为23Kb,本人想做基因测序，鉴别细菌种群，请问高手，怎么选取内切酶????跪求
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龟仙人[使用道具]
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发表于 2015-1-7 11:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
大家好，我在做RFLP方面的实验，向各位大侠请教个问题，就是我提的是活性污泥当中的细菌，基因组DNA为23Kb, ...

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看文献吧 看别人都用什么酶  呵呵
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