色谱爱好者之家

做的是同一物质分离(生物碱)，每次流动相配比相同，是一根没用多久的新柱，柱压稳定。可出现过几次没峰、出峰时间延迟、峰变形现象。搞不清楚怎会出现如此状况。望各位高手指导一下。

样品的原因比较大，还有就是机器的稳定性等~

是不是保护柱和流动相的问题，也有可能是柱子老化，柱子是放在什么溶液里保存的?总之好象是柱子的问题!你 延长时间再看看。

这个问题是生物碱类化合物HPLC含量测定的通病，主要是流动相可能含有离子对的盐类成分造成的。HPLC专题帖子我以前也回过加离子对的流动相的色谱条件的调节的帖子。

正如薄层色谱中生物碱展开剂要加氨水几滴可以改变斑点拖尾，生物碱一般以2种状态存在，一种为分子状态，一种为生物碱盐离子状态存在，加入离子对缓冲溶液是将生物碱的盐和分子状态全部与离子对形成(如：十二烷基硫磺酸钠)较稳定的键合状态，解析附容易，不容易拖尾。而事实上实际操作的时候，如果不规范，并没有达到这个目的，色谱柱的温度有一定的影响，还有实验完了就是注意冲洗盐，否则柱子基本报废，其他人做也会出现峰推迟。

感谢大家，逐渐有了点眉目

[ 本帖最后由 PURPOSE人生 于 2008-10-9 17:41 编辑 ]