小中大液质精密度问题
在做液质定量分析中药中多种成分时,以A:0.3%甲酸水,B:乙腈为流动相,采用梯度洗脱,洗脱程序:0-6min 20%-40% B,6-8min 40%-100% B,8-14 min 100% B,13 min内所定量成分能完全出峰,主要是香豆素和生物碱类,以前的液相条件在质谱上分离挺好,但20 min之后保留时间漂移较大,也曾用等度洗脱试,峰分不开,采用现在的梯度条件,保留时间基本稳定,做好线性关系后,精密度考察出现问题,采用多反应离子监测,每次所测含量呈不规律变化,有时高有时低,进样20多针相同浓度的混标液精密度依然很差,RSD能达到20多,有的成分含量前后能相差1倍,用的是Agilent1200的液相,6410 QQQ-MS
色谱柱是2.1×150 mm,1.8u的,流速是0.3 ml/min,混标液是用部分甲醇和部分流动相溶的,仪器也是前段刚检过的,都pass了,不知什么原因,是每次离子化程度不一样吗,请各位高手指教。还有做精密度、重现性、回收率时,每次都要做一次线性关系吗