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标题:【求助】哪位大神帮忙看看。。。急！

1221[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】哪位大神帮忙看看。。。急！

marker是2000bp的，marker左边的目的条带大小为490左右（退火温度52度），marker右边的目的条带为430左右（退火温度在57度）。

如何解决拖带问题呀？？？
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发表于 2015-1-13 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

加入DMSO
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
試試看跑gradient pcr 抓出最適溫度
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发表于 2015-1-13 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
胶太挫了
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发表于 2015-1-13 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

好像是胶的质量不太好，Marker 也跑不好
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toy[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
同楼上，胶没配好；还可以试试提高退火温度
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wood533[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

图中大部分应该是引物二聚体吧 看大小都在100一下 不像是PCR产物
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

似乎是胶的问题
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fangxiang[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

传说中的具有极强包容性的touchdown，应该能解决你pcr的问题，但是你做胶的问题就只能靠你自己了，貌似你的俩条带还是有的 啊，只是失败的怎么那么多啊
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

胶不好，你跑多大电压，退火温度可能需要提高
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